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热休克蛋白70反义脱氧寡核苷酸对宫颈癌HeLa细胞生长凋亡及化疗敏感性的影响

刘春梅  
【摘要】:目的 探讨用反义脱氧寡核苷酸封闭宫颈癌Hela细胞的HSP70基因,对宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡及顺铂化疗敏感性的影响。 方法 1.分别对体外培养的宫颈癌Hela细胞进行转染,实验分为正常对照组、正义寡核苷酸处理组、反义寡核苷酸处理组、随即寡核苷酸处理组。采用Western blot检测各组细胞HSP70蛋白表达的请况。 2.顺铂处理体外培养的宫颈癌Hela细胞,分为正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组。采用MTT法检测经顺铂处理的各组HeLa细胞的生长抑制率;流式细胞术检测经顺铂处理的各组HeLa细胞的凋亡率。 结果 1.正常对照组、反义寡核苷酸处理组、正义寡核苷酸处理组、随机寡核苷酸处理组HSP70蛋白灰度比值分别为(1.37±0.19)、(0.38±0。13)、(1.40±0.16)、(1.41±0.16)。转染反义脱氧寡核苷酸组的HSP70蛋白表达明显下降(P0.01),表明反义脱氧寡核苷酸转染能有效抑制宫颈癌Hela细胞HSP70蛋白的表达。 2.正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组细胞生长抑制率分别为(100.00+6.71)%、(81.29+5.42)%、(61.79士3.18)%、(81.72+6.41)%和(80.00±7.12)%。结果表明转染反义脱氧寡核苷酸组的生长抑制率明显高于其它各组(P0.01),抑制HSP70蛋白表达能增强顺铂对Hela细胞的生长抑制。 3.正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组细胞凋亡率分别为(4.32±1.57)%、(14.86±2.65)%、(24.61±2.90)%、(16.63±3.01)和(16.01+2.71)%。反义脱氧寡核苷酸组与顺铂处理组相比凋亡率明显增高(P0.05),与正常对照组相比P0.01。结果表明抑制HSP70蛋白表达能增加顺铂诱导的Hela细胞调亡。 结论 HSP70反义脱氧寡核苷酸通过下调HeLa细胞中HSP70蛋白表达,协同顺铂抑制Hela细胞增殖及促进Hela细胞调亡,提高了Hela细胞对化疗的敏感性。HSP70可望成为宫颈癌基因治疗的一个新靶


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