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吴茱萸次碱对急性胰腺炎的保护作用及其作用机制研究

李清福  
【摘要】:目的:观察吴茱萸次碱对急性胰腺炎的保护作用,应用竞争性辣椒素受体阻断剂辣椒平,探讨吴茱萸次碱的保护作用是否与通过激活辣椒素受体刺激内源性CGRP释放有关。 方法:雄性SD大鼠100只,随机均分为10组:(1)假手术组,(2)急性胰腺炎(AP)组,(3)假手术+吴茱萸次碱组(100μg/kg, iv),(4) AP+吴茱萸次碱低剂量组(30μg/kg, iv),(5) AP+吴茱萸次碱中剂量组(100μg/kg, iv),(6) AP+吴茱萸次碱高剂量组(300μg/kg, iv),(7)假手术+辣椒平组(3mg/kg, iv),(8) AP+辣椒平组(3mg/kg, iv),(9)AP+辣椒平(3mg/kg, iv)+吴茱萸次碱组(100μg/kg, iv),(10)溶媒对照组。除假手术组、假手术+吴茱萸次碱组、假手术+辣椒平组外,剩余各实验组大鼠以5%牛磺胆酸钠行胰胆管逆行注射建造急性胰腺炎模型,造模完毕24小时后,行颈动脉插管收集血液标本,然后处死各组大鼠,开腹收集并测定各组大鼠腹水量,分离获取胰腺组织标本,观察胰腺大体病理学改变,行苏木紫-伊红(H-E)染色观察胰腺组织病理改变并评分,大鼠血清淀粉酶活性在全自动生化分析仪上检测,应用Elisa方法测定血清IL-6, TNF-α, IL-10浓度,用放射免疫法检测血浆降钙素基因相关肽(CGRP)含量。 结果:(1)大鼠胰腺病理组织学检查改变:除假手术组、假手术+吴茱萸次碱组、假手术+辣椒平组外,其余各实验组大鼠均不同程度的呈现急性胰腺炎症和坏死病理学改变,其中AP+辣椒平组及AP+辣椒平+吴茱萸次碱组的胰腺组织炎症坏死程度最为严重,AP组及溶媒对照组次之,AP+吴茱萸次碱低剂量、中剂量、高剂量组的胰腺炎症和坏死不同程度减轻,随药物剂量的增加而改善明显。胰腺组织病理学评分结果显示,AP+吴茱萸次碱低剂量组、中剂量组及高剂量组评分均低于AP组(P0.05),三个剂量组间相互两两比较,差异亦有统计学意义(P0.05);AP组与溶媒对照组评分接近,两组间差异无统计学意义(P0.05);而AP+辣椒平组及AP+辣椒平+吴茱萸次碱组评分均高于AP组(均P0.05);AP+辣椒平+吴茱萸次碱组较AP+吴茱萸次碱中剂量组评分明显增高(P0.05)。 (2)假手术组、假手术+吴茱萸次碱组及假手术+辣椒平组腹腔仅见极少量腹水;AP组及溶媒组腹水量较假手术组显著增加(P0.05),但AP组与溶媒组腹水量比较差异无统计学意义(P0.05);吴茱萸次碱各剂量组腹水量较AP组减少,而其中以吴茱萸次碱中剂量组及高剂量组腹水量降低最明显,差异有统计学意义(P0.05);而AP+辣椒平组腹水量高于AP组(P0.05),AP+辣椒平+吴茱萸次碱组较AP组无差异(P<0.05);AP+辣椒平+吴茱萸次碱组腹水量较吴茱萸次碱中剂量组明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。 (3)假手术组、假手术+吴茱萸次碱组及假手术+辣椒平组血清淀粉酶活性均维持在较低活性,而AP组及溶媒对照组血清淀粉酶活性显著增高(P0.05),但两组之间差异无统计学意义(P0.05)。吴茱萸次碱各剂量组血清淀粉酶活性较AP组降低(均P0.05),以吴茱萸次碱中、高剂量组降低明显;而AP+辣椒平组及AP+辣椒平+吴茱萸次碱组血清淀粉酶活性较AP组升高更明显(均P0.05);AP+辣椒平+吴茱萸次碱组血清淀粉酶活性与吴茱萸次碱中剂量组相比较差异明显(P0.05)。 (4)假手术组、假手术+吴茱萸次碱组及假手术+辣椒平组大鼠血清IL-6、TNF-α浓度均较低,且三组间无差异(P0.05);其余各组与假手术组比较,大鼠血清IL-6和TNF-α浓度均有不同程度升高(均P0.05)。吴茱萸次碱各剂量组大鼠血清IL-6和TNF-α浓度相对于AP组明显降低,其中以中剂量组及高剂量组降低更明显,差异均有统计学意义(均P0.05);造模前先注射辣椒平的实验大鼠,血清IL-6和TNF-α浓度均高于AP组,差异均有统计学意义(均P0.05)。与假手术组比较,AP组和溶媒对照组中大鼠血清IL-10浓度稍有升高,差异仍有统计学意义(P0.05),但AP组与溶媒对照组之间无差异(P0.05)。吴茱萸次碱各剂量组、假手术+吴茱萸次碱组中大鼠血清IL-10水平均显著高于假手术组和AP组(均P0.05)。实验前注射辣椒平后,血清IL-10水平较AP组下降,差异均有统计学意义(均P0.05),其中AP+辣椒平+吴茱萸次碱组与吴茱萸次碱中剂量组相比较,血清IL-10水平降低明显,差异有统计学意义(P0.05)。 (5)与假手术组比较,AP组及溶媒对照组血浆CGRP浓度水平稍升高,差异显著(P0.05);假手术+吴茱萸次碱组血浆CGRP浓度较假手术组升高明显(P0.05),吴茱萸次碱低剂量组、中剂量组及高剂量组血浆CGRP浓度较AP组明显升高,差异有统计学意义(P0.05),且三组间CGRP浓度随药物剂量增加而逐渐升高,三组之间两两相互比较,差异有统计学意义(均P0.05);而实验前注射辣椒平的各实验组大鼠,血浆CGRP浓度明显降低,与假手术组相近无差异(P0.05),其中AP+辣椒平组与AP组比较,AP+辣椒平+吴茱萸次碱组与吴茱萸次碱中剂量组比较,血浆CGRP浓度均明显下降,差异均具有统计学意义(P0.05)。 结论:1.吴茱萸次碱对急性胰腺炎具有保护作用。2.吴茱萸次碱通过激活辣椒素受体刺激大鼠内源性CGRP释放,进而改善胰腺组织微循环,降低促炎症细胞因子释放及增加抗炎症因子释放,减轻胰腺炎症及坏死程度,其作用可被辣椒平阻断。


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