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脂质体转染bFGF-mRNA的AS-ODN对人良性前列腺增生基质细胞的影响

易路  
【摘要】: 目的 探讨脂质体介导的bFGF-mRNA的反义寡核苷酸(AS-ODN)对人良性前列腺增生基质细胞的影响。 方法 以脂质体为载体将人工合成的bFGF-mRNA的反义寡核苷酸转染入体外培养的原代人BPH基质细胞中;用形态学及免疫组化的方法对前列腺基质细胞进行鉴定;以MTT法检测前列腺基质细胞的增殖情况;以RT-PCR检测前列腺基质细胞中bFGF-mRNA的表达。 结果 形态学观察及免疫组化鉴定α-平滑肌肌动蛋白和波形蛋白阳性结果显示所培养的细胞为以平滑肌和成纤维细胞为主的前列腺基质细胞。MTT法显示脂质体介导的bFGF-mRNA的AS-ODN可明显抑制人良性前列腺基质细胞的增殖;脂质体转染的AS-ODN最佳有效浓度为0.8uM;转染24小时后最明显,而空白组,反义组,正义组,脂质体组,脂质体转染正义寡核苷酸组的细胞增殖未受抑制(p<0.05);单纯AS-ODN即使浓度达到8uM也无抑制作用(p>0.05)。RT-PCR显示脂质体介导的0.8uM bFGF-mRNA的AS-ODN转染入前列腺基质细胞后24小时基质细胞中的bFGF-mRNA的扩增条带与对照组相比明显减弱(p<0.05) 结论 脂质体转染bFGF-mRNA的AS-ODN对人良性前列腺增生基质细胞的增殖有明显抑制作用。利用反义技术抑制重要细胞因子作用是前列腺增生基因治疗的合理策略之一。


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