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氧化亚铁硫杆菌遗传多样性及比较蛋白质组学研究

贺治国  
【摘要】:T.f菌(氧化亚铁硫杆菌)是主要的浸矿细菌之一,为了探讨T.f菌浸矿机理,提高生物浸出的效率,本文从T.f菌的遗传多样性及比较蛋白质组学等方面做了系统的研究。 本研究采用RAPD分子标记技术对7个不同来源的T.f菌菌株的遗传多样性进行了研究。首先采用正交实验方案对影响RAPD实验的一些影响因素如Mg~(2+)浓度、TAQ酶的用量等进行了优化,从而保证了RAPD反应的稳定性和可重复性。通过T.f菌的RAPD分子标记的研究,发现来源不同的T.f菌菌株之间存在较大的差异性,最大的相关系数是82.93%,最小的相关系数是44.44%。对T.f菌的氧化活性的测定也发现不同的菌株之间存在较大的差异,其中城门山T.f菌菌株活性最强,作为后面的试验菌株。 通过测定不同培养条件下的T.f菌的生长曲线,揭示了分别在以单质硫、Fe~(2+)及磷酸盐缺失条件下T.f菌菌株的生长规律。使用pH 2.0的9K基本培养基,在30℃条件下置培养箱充气培养,记录不同时间点的活菌数。研究表明,T.f菌和其它细菌培养相似,也有静止期、对数生长期、稳定期和衰老期。在以Fe~(2+)为营养源的培养条件下,氧化亚铁硫杆菌的生长对数期为培养的第10~32hrs,T.f菌的最高浓度可达1×10~(7.5)cells/ml,在对数生长期,T.f菌复制一代所需的时间约为1.59hrs;磷酸盐缺失条件培养的T.f菌的对数期为第20~60hrs间,T.f菌的最高浓度只有约为1×10~(5.5) cells/ml,T.f菌复制一代所需时间


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