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HBV基因型与乙型病毒性肝炎临床关系及发病机制的研究

温志立  
【摘要】:第一部分HBV 基因型与乙型病毒性肝炎临床关系的研究 目的采用多对型特异性引物,通过巢式-聚合酶链式反应(PCR)法检测湖南省乙型病毒性肝炎(乙肝)患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况。同时用这种多对型特异性引物巢式PCR 法研究了HBV基因型与临床表现的关系。 方法根据从前S1 基因到S 基因中的保守序列设计出10 条内外引物,并将其中8 条内引物分成A、B 两组,分别扩增A、B、C 和D、E、F 型HBV,然后将第二轮PCR 的两组产物分别用3%琼脂糖进行电泳,根据PCR 产物片断大小直接判定HBV 基因型。与目前常用的聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法进行了比较,并做重复试验以证实该方法的可靠性和准确性。收集湖南省内HBV 慢性携带者,慢性乙肝轻度、中度、重度和慢性重型乙肝等5 种临床类型的慢性HBV 感染者的血清220 例,采用型特异性引物进行巢式PCR 法对血清中的HBV 进行基因分型,了解湖南人群的HBV 基因型分布情况,并将不同基因型的临床资料进行统计学分析比较。 结果多对型特异性引物对巢式PCR 法与PCR-RFLP 法的结果完全一致,重现率(100%); 湖南HBV 感染人群HBV 基因分型结果为B 型190例(86.4%)、C 型30 例(13.6%)。随着病情加重,基因C 型的比例增加(P0.05)。C 基因型病人中的重病例比例显著高于B 基因型(P0.05)。C 型的丙氨酸转氨基酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、HBV-DNA 等平均水平都较B 型高,但无统计学意义。不过,C 型的ALT 升高率(96.7%)显著高于B 型(75.2%)(P0.05)。B、C 两型的HBeAg 阳性率总体无差别,但在慢性重型以及21-30 岁年龄段的患者中,C 型的HBeAg 阳性率(35.0%和50.0%)均显著高于B 型(14.4%和24.5%)(P 均0.05)。 结论这种新的巢式PCR 分型法能清晰直观地辨别HBV 基因型,结果准确可靠。用此法证实了湖南人群中的HBV 感染其优势基因型以B 型为主,C 型次之。基因型与临床表现有相关性,C 型引起的病情较B 型严重。


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