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慢性鼻窦炎、鼻息肉与正常鼻粘膜组织差异蛋白质的检测及其意义

吴敏曼  
【摘要】:慢性鼻窦炎和鼻息肉是鼻粘膜的慢性炎症性病变。近年来,越来越多的基础研究证实慢性鼻窦炎和鼻息肉在病因上是多因素,在病理上是多环节,在细胞和分子生物学水平是多基因、多信号转导途径参与的结果,其中涉及大量不同的蛋白质。正因为如此,对其发病机理、预后判断和临床分期标准长期以来没有统一的认识,妨碍了慢性鼻窦炎和鼻息肉临床研究和诊断、治疗水平的提高。蛋白质是生命活动的直接执行者。随着蛋白质组学这一新兴科研方法的出现,使我们能在同一实验体系中高通量筛选慢性鼻窦炎、鼻息肉、鼻息肉病和正常鼻粘膜组织间差异表达的蛋白质,从而探索不同病变组织之间生命活动的差别。在前期研究中,我们在国内外领先进行了慢性鼻窦炎、鼻息肉和正常鼻粘膜组织的PH3-10差异蛋白质组研究,发现大多数蛋白质的等电点(PI)在PH 4~8的范围。因此在本次试验中,我们采用PH4-7窄梯度的IPG胶条进行慢性鼻窦炎、鼻息肉和正常鼻粘膜组织的差异蛋白质组研究,目的在于提高分辨率,获得较好的分离效果,尽可能显示低丰度蛋白质。然后采用免疫组化试验并扩大标本量来进一步验证部分有意义的差异蛋白质在慢性鼻窦炎、鼻息肉和正常鼻粘膜组织之间的差异表达并观察其在组织细胞中的定位情况。因为只有通过反复验证的蛋白质才具有可靠性和稳定性。最后将鉴定出的有意义的差异蛋白质与临床疗效联系起来,应用SPSS 10.0统计软件中的等级相关性检验和logistic回归分析方法统计影响慢性鼻窦炎和鼻息肉疗效的蛋白质分子,这将为建立判断慢性鼻窦炎和鼻息肉预后的客观指标和新的分型分期标准积累实验室依据。 第一章 慢性鼻窦炎、鼻息肉与正常鼻粘膜组织差异蛋白质的检测及其意义 目的:进行慢性鼻窦炎、鼻息肉和正常鼻粘膜组织PH4-7梯度的差异蛋白质组研究,鉴定出三者之间差异表达的蛋白质。 材料和方法:应用PH4~7固相PH梯度胶条行双向凝胶电泳(2-DE),胶体


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