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短暂性前脑缺血再灌注及美满霉素干预后Hsp27及Caspase-9表达的研究

吴亚琨  
【摘要】: 目的:观察蒙古沙鼠前脑缺血再灌注损伤及美满霉素干预后Hsp27和Caspase—9的表达变化及二者表达的相关性和保护机制,探讨其在短暂性脑缺血发作(TIA)中的意义。 方法:(1)分组:健康雄性蒙古沙鼠50只,随机分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组(I/R)、美满霉素干预组(MI/R);观察在脑缺血再灌注后6h、1d、3d、7d的各相应时间点Hsp27及Caspase-9的表达;(2)模型制作:对照组沙鼠予以夹闭双侧颈总动脉10min后再灌注;假手术组沙鼠仅分离双侧颈总动脉不予以夹闭;美满霉素干预组于缺血再灌注前一天腹腔注射美满霉素(剂量为45mg/kg,Bid)然后建立缺血再灌注模型;(3)HE染色观察病理变化;(4)免疫组织化学染色观察表达变化。 结果:(1)HE染色:I/R组可见胶质细胞增生肥大,神经元变性、坏死。而相应时间点的MI/R组脑组织损伤程度均明显轻于脑缺血再灌注组。 (2)免疫组化:正常对照组与假手术组沙鼠前脑神经元及胶质细胞中均可见Hsp27及Caspase-9少量阳性表达,Hsp27在缺血再灌注损伤后在各时间点表达显著上调,在1d时达到高峰,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。缺血再灌注损伤后Caspase-9在各相应时间点表达显著上调,在1d时达到高峰,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。且两者随时间推移表达变化的趋势一致。美满霉素干预组在缺血再灌注损伤后,Caspase-9表达在各相应时间点较对照组表达上调,趋势与缺血再灌注组一致,但Caspase-9阳性率明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。美满霉素干预组在缺血再灌注损伤后,Hsp27的表达无明显变化。 结论:沙鼠前脑缺血再灌注后前脑组织Hsp27及Caspase-9表达上调,推测Hsp27可能通过抑制CaSpase-9的活性而起到凋亡负性调节的作用。美满霉素干预可能通过降低Caspase-9的表达,而发挥其抗凋亡作用。本研究尚未发现美满霉素干预后Hsp27的表达有明显变化。


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