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自发性高血压大鼠醛糖还原酶活性变化及卡托普利和杜仲木质素对其活性影响

王俊杰  
【摘要】: 醛糖还原酶(Aldose Reductase,AR)属于还原型辅酶Ⅱ依赖性醛-酮还原酶族,在体内呈单体形式并广泛分布。对AR的研究始于糖尿病,以AR为靶点的醛糖还原酶抑制剂(Aldose Reductase inhibitors,ARI)已成为临床上防治糖尿病并发症的有效药物。最新研究显示,多种氧化应激可以激活AR,激活的AR可以促进炎症反应和VSMC增殖。由于高血压是一种炎症反应,又是一种氧化应激状态,VSMC增殖是高血压血管重塑的主要机制,因此推测AR可能参与了高血压心血管重塑。关于高血压与AR活性的关系、AR是否参与了高血压心血管重塑以及作用于肾素-血管紧张素(RAS)系统的降压药物防治高血压心血管重塑的作用是否与AR有关目前国内外均无报道。 目的:阐明高血压AR活性的变化以及卡托普利、杜仲木质素对其活性的影响,为深入研究AR在高血压心血管重塑中的作用和机制提供基础。 方法:通过研究血红蛋白浓度、加样间隔时间、激发荧光水浴时间以及NADP溶液贮存时间对荧光强度的影响,优化红细胞AR活性测定的NADP生成法。采用优化的NADP生成法测定10、14、18周龄自发性高血压大鼠(SHR)红细胞AR活性的变化;采用紫外分光光度法测定18周龄SHR心肌AR活性以及研究作用于RAS系统的降压药物卡托普利、杜仲木质素对SHR心肌AR活性的影响。采用采用分光光度法、免疫荧光法测定各组血浆活性物质:一氧化氮(NO)、肾素(RA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、降钙素基因相关肽(CGRP)的含量。 结果:(1)NADP生成法的精确度受血红蛋白、加样间隔时间、水浴反应时间影响;在激发荧光前将反应体系生成的NADP溶液贮存于-20℃的条件下至少可以稳定保存4周。(2)10、14周龄SHR红细胞AR活性与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);18周龄SHR红细胞AR活性(29.6±1.6)高于正常对照组(26.5±0.8)(P<0.05),18周龄SHR心肌AR活性(0.091±0.010)显著高于正常对照组(0.030±0.014)(P<0.05)。(3)SHR卡托普利组心肌AR活性(0.032±0.012)显著下降(P<0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);SHR木脂素组心肌AR活性(0.060±0.011)下降(P<0.05),但高于正常对照组(P<0.05)。各组AR活性变化趋势与血浆NO、RA、CGRP的含量变化不一致,与AngⅡ浓度变化成直线相关性(R=0.695,P=0.004)。 结论:(1)优化的NADP生成法可以准确测定红细胞AR活性。(2)SHR的AR活性增强。(3)作用于RAS系统的降压药物卡托普利、杜仲木质素均可显著抑制AR活性,其机制可能与抑制AngⅡ有关。


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