痫能转道对青霉素致痫大鼠Cxs的影响

【摘要】： 目的：通过在致痫灶内置入金属电极，观察电极对痫性放电扩散通路的影响，明确有目的将痫性放电实施转道，能否有助于减弱痫性放电在脑内的扩散。 方法：采用青霉素在大鼠海马微注射制备急性痫性发作模型(注射点均为右侧海马)，将36只SD大鼠被随机分为六组，每组6只。分别为： 模型组(A)：仅制作青霉素致痫模型，不用电极置入致痫灶；自体脑外转道组(B)：经青霉素致痫后，在致痫灶内置入微电极的一端，另一端通过导线与自体颅外肌肉组织相接；自体脑内转道组(C)：经青霉素致痫后，致痫灶内置入微电极一端，另一端通过导线引入自体的对侧海马； 异体转道痫能导出组(D1)：经青霉素致痫后，在致痫灶内置入微电极的一端，另一端外接导线(通过导线与异体转道痫能接收组电极相连)； 异体转道痫能接收组(D2)：在实验鼠右侧海马置入微电极的，电极另一端外接导线(通过导线与异体转道痫能导出组电极相连)； 对照组(F)：即不用青霉素致痫，仅在以上各组致痫灶相同位点插入电极。 六组大鼠经致痫后予以行为学评分，并于致痫后2h、3h、4h记录每组大鼠5分钟的痫性发作次数，同时在致痫后2h行脑电图记录。4h时将大鼠断头取脑，做冰冻切片，用免疫组化法检测缝隙连接蛋白Cx26、Cx32、Cx43的表达变化，进行图片采集和灰度值测定，做统计学分析。 结果： 1．行为学变化比较： 1．1除对照组无痫性发作外，其他各组痫性发作形式以Racine分级四级——多肢抽动伴倾倒为主； 1．2发作次数随时间延长逐渐减少；各试验组与模型组发作次数比较无显著性差别； 1．3当D1与D2的电极经导线相连接5—10分钟后，D2组出现类似于D1组的痫性症状发作，每次发作紧跟D1组大鼠之后，频率基本相同，仅程度稍轻。至观察结束时间4h时，D2组大鼠发作仍未停止。而F组没有观察到痫性发作。 2．EEG比较： 2．1 F组无痫性EEG发作； 2．2 B组较A组2小时点EEG放电次数减少，P＜0.05；2.3 D1与D2组2小时点EEG放电次数无显著差别，P＞0.05。 3．缝隙连接蛋白表达变化比较： 3．1 Cx26、Cx32蛋白表达： 3．1．1 A组左右两侧海马Cx26、Cx32的表达程度一致(P＞0.05)，说明右侧海马区致痫后，痫性放电可经脑内扩散至对侧； 3．1．2 B组右侧海马Cx26、Cx32表达较左侧多(P＜0.05)，说明金属电极置入减少痫能在脑内的扩散，金属电极可能将一部分痫能转道至脑外的肌肉组织； 3．1．3 D1与D2组均见Cx26、Cx32的表达，且高于F组(P＜0.05)，至少说明痫性电能可以通过金属电极从D1导出，并导致接收鼠D2组出现痫性电活动变化； 3．1．4 D1与D2相比，D2低于D1组(P＜0.05)，说明痫性电能不能完全被转道，仍有一部分痫性放电在D1组脑内扩散。 3．2 Cx43的表达：Cx43在少数切片中发现阳性表达产物，但无法进行统计分析。 结论： 1．金属电极在致痫灶内置入，在一定程度上下调Cx26，Cx32的表达，可能与减少痫性放电在脑内扩散有关； 2．脑内痫性放电可以被导出，将脑内痫性放电实施有目的转道，可望成为抗癫痫治疗的新途径。