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胎球蛋白A在急性肝衰竭中的保护作用研究

张磐  
【摘要】: 目的:(1)探讨慢性重型肝炎患者的血清胎球蛋白A(fetuin—A)水平与肝损害程度、预后及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor—α,TNF-α)的关系。(2)体外观察在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,胎球蛋白A对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分泌TNF-α和IL-6的影响。(3)建立一种简便、有效、稳定的暴发性肝衰竭(fulminant hepatic failure,FHF)动物模型,观察该模型动物不同时间点胎球蛋白A的表达情况;并用胎球蛋白A对FHF模型小鼠进行干预,观察胎球蛋白A对实验动物肝功能、肝脏组织学改变、肝细胞凋亡率和病死率的影响,并进一步探讨可能的机制。 方法:(1)设立健康对照组、慢性肝炎组和慢性重型肝炎组,慢重肝组中分设恢复组和未恢复组,检测血清胎球蛋白A、TNF—α、凝血酶原活动度、白蛋白和总胆红素。(2)常规分离培养人外周血单个核细胞,2%台盼蓝进行细胞活力检测后,分组观察胎球蛋白A干预对上清液中TNF-α和IL-6的表达量变化(ELISA法)。(3)采用析因试验法,以小鼠24 h病死率为评价指标,以实验鼠的血清肝功能和肝组织病理学改变为验证指标,建立规范化小鼠FHF模型。(4)利用RT-PCR、Western Blot和免疫组化技术,分别从mRNA水平和蛋白质水平研究FHF模型小鼠胎球蛋白A的表达变化。(5)分组观察胎球蛋白A的干预对模型小鼠的24h病死率、肝功能、肝组织病理改变(HE染色)、肝细胞凋亡率(原位末端标记法,TUNEL)改变和血清中TNF-α和IL-6的水平(ELISA法)的影响。 结果:(1)血清胎球蛋白A水平在慢性重型肝炎患者(114.02±89.11μg/ml)较健康对照者(317.75±107.83μg/ml)和慢性肝炎患者(253.14±206.45μg/ml)明显降低(P<0.01);在慢性重型肝炎患者未恢复组(82.53±47.90μg/ml)较恢复组(203.05±112.94μg/ml)明显降低(P<0.01);与凝血酶原活动度(Rho=0.493,P<0.01)和血清白蛋白水平显著正相关(Rho=0.420,P<0.01),与血清总胆红素水平显著负相关(Rho=—0.463,P<0.01);与血清TNF—α水平显著负相关(Rho=—0.378,P<0.01)。(2)胎球蛋白A与精胺的联合应用显著抑制了LPS刺激下人PBMC分泌TNF-α(24.89±7.71 pg/ml)和IL-6(112.91±37.80 pg/ml)的水平(P<0.01)。 (3)采用析因实验法筛选出D-GalN 800 mg/kg+LPS 0.04 mg/kg和D-GalN 600 mg/kg+LPS 0.5 mg/kg均为合适建模剂量组合,并通过验证实验确证。(4)在FHF小鼠模型中,随着肝损伤的加重,胎球蛋白A的表达逐渐减少,胎球蛋白AmRNA的表达量下降早于蛋白。免疫组化的结果显示胎球蛋白A主要在肝细胞的胞浆中表达,部分在胞膜表达。(5)胎球蛋白A干预明显降低FHF小鼠的病死率(由83%降至25%,P<0.05),明显降低血清ALT的水平(由291370.76±29241.68nkat/L降至31585.15±4086.35 nkat/L,P<0.05),降低血清和肝组织中TNF—α和IL-6的水平(P<0.05),减轻肝组织炎症坏死程度,减轻肝细胞凋亡的程度(凋亡指数由FHF模型组的23.10±7.39降至2.20±2.97,P<0.05)。 结论:(1)慢性重型肝炎患者的血清胎球蛋白A水平与肝脏损害严重程度、血清TNF-α水平及预后密切相关。(2)胎球蛋白A和精胺合用可以有效抑制LPS刺激下人PBMC释放TNF-α和IL-6。(3)以析因实验法建立一种规范、重复性好、费效比低的FHF模型;在该模型中,随着肝损伤的加重,胎球蛋白A的表达逐渐减少;胎球蛋白A的干预可以改善由D-Galn和LPS诱导的暴发性肝衰竭,其可能的机制之一是通过抑制TNF-α和IL-6等炎症介质的表达。


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1 Rajvanshi P.;Kowdley K.V.;Hirota W.K. ;赵丽娜;;继发于肝内瘤组织浸润的暴发性肝功能衰竭[J];世界核心医学期刊文摘.胃肠病学分册;2005年09期
2 王寿增;;暴发性肝衰竭治疗中的几个问题[J];中国临床医生;1986年02期
3 傅晓芸;;暴发性肝衰竭时脑中1,4-苯二氮(艹卓)类浓 度升高[J];国外医学.内科学分册;1992年12期
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6 Nouel O;桂郁馥;;慢性心脏病患者一过性循环衰竭引起的暴发性肝衰竭[J];新疆医科大学学报;1981年S1期
7 池肇春;;暴发性肝衰竭的临床表现[J];中国医师进修杂志;1982年12期
8 李军;;庚型肝炎和暴发性肝衰竭:输血相关感染的证据[J];传染病信息;1997年04期
9 苏盛;;急性病毒性肝炎所致的暴发性肝衰竭[J];天津医药;1983年06期
10 朱同刚;;凝血酶原时间是扑热息痛所致暴发性肝衰竭的预后指标[J];国际流行病学传染病学杂志;1991年04期
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12 潘敬运;;前庭眼反射在暴发性肝衰竭中的预后意义[J];国外医学.内科学分册;1978年Z2期
13 乔汉臣;;暴发性肝功能衰竭的主要合并症[J];临床医学;1983年06期
14 李春元;抗凝血酶Ⅲ治疗暴发性肝衰竭[J];国外医学.消化系疾病分册;1989年02期
15 刘德旺;;奥美拉唑引起的暴发性肝衰竭[J];国外医学.内科学分册;1993年06期
16 张浩;奎映仙;;暴发性肝衰竭11例临床分析[J];云南中医中药杂志;2006年01期
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18 林垠;“心血管疾病临床合理用药”和“暴发性肝衰竭诊断治疗及肝移植新进展新技术”研讨会胜利召开[J];医药世界;2005年08期
19 罗红雨;杨旭;;暴发性肝衰竭型肝豆状核变性[J];国际消化病杂志;2007年03期
20 ;肝及胆疾病[J];国外科技资料目录(医药卫生);1997年03期
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1 宁琴;;暴发性肝衰竭的实验研究及其临床意义[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年
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3 毛德文;胡振斌;刘洁;邱华;;解毒化瘀颗粒对肝衰竭模型大鼠肝脏脂质过氧化的影响[A];第一次全国中西医结合传染病学术会议论文汇编[C];2006年
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9 曾晖;周志金;;饮食、休息、情绪对急性肝衰竭的影响[A];首届江西省中西医结合肝病学术研讨会、首届江西省中西医结合肝病新进展学习班资料汇编[C];2008年
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1 张磐;胎球蛋白A在急性肝衰竭中的保护作用研究[D];中南大学;2007年
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1 冯竞;董家鸿:让肝移植造福更多患者[N];科技日报;2004年
2 中南大学湘雅二医院肝病研究中心 罗红雨 博士;谈药物性肝炎[N];中国医药报;2002年
3 湘雅二医院肝病研究中心 罗红雨 杨旭;当心药物损肝[N];大众卫生报;2001年
4 冯琳;西南医院:肝移植瞄准国际水平[N];科技日报;2001年
5 南京军区福州总医院消化科 张捷;酒精肝脂肪肝多了[N];健康报;2001年
6 本报记者 郑灵巧;传染病死亡榜单:艾滋病连续三年排第一[N];健康报;2011年
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