收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

NF-κB在子宫内膜异位症发病机制中的作用研究

孙晓红  
【摘要】: 背景:子宫内膜异位症(endometriosis,EM),简称内异症,是一种常见且难治的妇产科疾病,发病率约占生育年龄妇女的15%,近年来有明显上升趋势。内异症所引起的痛经、下腹痛及性交痛等,严重地影响了妇女的健康和生活质量,也是不孕症的主要病因之一。其病变广泛,形态多样,且有浸润性生长、广泛种植转移和易复发的恶性生物学行为,成为妇产科的棘手疾病之一。内异症的发病机制尚不完全清楚,目前广泛接受的是1925年Sampson提出的经血逆流子宫内膜种植学说,但内膜种植及其侵袭转移是多因素参与的复杂过程。逆流的内膜碎片经过黏附、侵袭及血管生成的过程,才能继续存活,形成内异症。期间涉及众多细胞因子、酶、生长因子等,并涉及遗传、内分泌障碍,免疫功能异常。近年来,关于内异症在位内膜本身所具有的特点及其在发病中的作用,逐渐受到人们的重视。 核因子Kappa B(NF-κB)广泛存在于真核细胞中,一般状态下以同源或异源二聚体形式与其抑制蛋白IκB形成复合物,以非活性状态存在于胞浆中,在受到生理或有害因素的刺激后,依靠信号传导系统由无活性状态转变为活性状态,激活后的NF-κB从NF-κB-IκBs复合物中解离,进入细胞核,与相应的靶基因结合,启动转录。其活化过程不需要合成新的蛋白,故能及时引起细胞反应早期的功能变化,继发引起其他因子的产生和活化。NF-κB是一种普遍性的转录因子,作用于多种靶基因。其靶基因涉及细胞因子、细胞膜受体、膜黏附分子、急性期蛋白、生长因子、转录因子等的编码基因。因此,NF-κB的活性关系到一些细胞的生长分化、炎症反应、免疫应答、肿瘤生长等生物学过程。 近年来,核转录因子已成为肿瘤研究的一个新热点,已发现与肝细胞癌、前列腺癌、胃癌、支气管肺泡癌、直肠癌、乳腺癌、宫颈癌、神经胶质瘤等恶性肿瘤的发生、发展、疾病分期及预后均有一定的相关性。但NF-κB在内异症中的作用研究甚少,国外有研究发现TNF-α及IL-1β通过NF-κB介导的信号途径,刺激单核细胞和T细胞选择性趋化因子(RANTES)表达增加,从而诱导内异症的发生。内异症的发生与异位内膜在异位黏附、种植、血管形成等过程有关,并涉及众多炎症性细胞因子、生长因子等,而NF-κB的异常激活可上调与这些过程有关的细胞因子,如VEGF、ICAM-1、MMP-9、Bcl-2、IL-1β、TNF-α等,故探讨NF-κB在子宫内膜异位症发病机制中的作用是本课题的研究目的。 研究目的 1用免疫组织化学的方法检测NF-κBp65、VEGF、ICAM-1、MMP-9和Bcl-2在内异症患者的在位及异位子宫内膜组织中的表达及NF-κB与VEGF、ICAM-1、Bcl-2和MMP-9之间的相关性来探讨NF-κB与内异症的关系。 2体外培养正常子宫内膜细胞、在位及异位子宫内膜细胞,分别给予脂多糖(LPS)及LPS+二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC)进行干预,用Western Blot方法检测三组子宫内膜细胞的NF-κBp65蛋白浓度及了解LPS、LPS+PDTC对在位及异位子宫内膜细胞NF-κB蛋白浓度的影响;用ELISA方法检测三组子宫内膜细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α浓度及LPS、LPS+PDTC对三组子宫内膜细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α浓度的影响,探讨NF-κB在内异症中的发病机理。 3建立SD大鼠内异症模型,用NF-κB的抑制剂NF-κB反义寡核苷酸(antisense-Oligonucleotides,ASODN)干预治疗内异症模型,观察NF-κB ASODN治疗后对大鼠成模率、异位病灶及对TNF-αmRNA的影响,进一步探讨NF-κB在内异症发病机制中的作用。 方法及结果 1.NF-κB在内异症中的表达收集2006年4月至2006年10月34例rAFSⅠ-Ⅳ期的内异症患者34例做为研究组,其中在位内膜32例,异位内膜34例;CIN患者30例做为对照组。采用免疫组织化学SP法分别检测NF-κ3、VEGF、ICAM-1、Bcl-2、MMP-9在30例正常子宫内膜、32例在位内膜及34例异位内膜中的表达。结果表明:(1)NF-κB、VEGF、ICAM-1、Bcl-2和MMP-9主要表达于三组子宫内膜的腺上皮细胞,在异位内膜的间质及血管内皮中亦有少量表达。在位及异位子宫内膜表达与对照组正常子宫内膜相比,差异有极显著统计学意义(P<0.001);(2)在位及正常子宫内膜的NF-κB表达不随月经周期的改变而改变,在位及正常子宫内膜在增生期与分泌期相比,差异无统计学意义(P>0.05);(3)NF-κB的表达与内异症的临床期别存在一定的相关性,在在位子宫内膜组织Ⅱ期的表达最强,Ⅱ期与Ⅳ期相比,差异有极显著统计学意义(P<0.001);异位子宫内膜中Ⅰ期的表达与Ⅳ期相比,差异有显著统计学意义(P<0.01);Ⅱ期的表达与Ⅳ期相比,差异有极显著统计学意义(P<0.001);(4)NF-κB与VEGF、ICAM-1、Bcl-2、MMP-9之间具有正相关性,相关系数分别是0.77、0.5、0.63及0.57(P<0.001)。 2.内异症体外模型中LPS、PDTC对三组子宫内膜细胞NF-κB蛋白浓度及对IL-1β、TNF-α浓度的影响(1)体外培养异位子宫内膜细胞、在位子宫内膜细胞及对照组正常子宫内膜细胞,分别给予LPS及LPS+PDTC干预刺激,用Western Blot方法检测三组子宫内膜细胞的NF-κB蛋白浓度,及LPS及LPS+PDTC干预后NF-κB的蛋白浓度变化。(2)用ELISA方法检测三组子宫内膜细胞培养上清液的IL-1β、TNF-α的浓度,及LPS及PDTC干预后三组子宫内膜细胞培养上清液的IL-1β、TNF-α的浓度变化。结果表明:(1)在子宫内膜细胞、在位及异位子宫内膜细胞这三组中,在位内膜细胞及异位内膜细胞的NF-κB蛋白浓度显著高于子宫内膜细胞,其差异有显著统计学意义(P<0.01);在位及异位子宫内膜细胞NF-κB的蛋白表达LPS组最高,显著高于对照组及LPS+PDTC组,差异有显著统计学意义(P<0.01),PDTC可抑制NF-κB蛋白表达。(2)在位及异位子宫内膜细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α浓度明显高于正常子宫内膜细胞,差异有显著统计学意义(P<0.01);在位及异位子宫内膜细胞之间比较,异位子宫内膜细胞培养上清液中的IL-1β、TNF-α浓度高于在位子宫内膜细胞,差异有显著统计学意义(P<0.01);在分别给予LPS、LPS+PDTC干预后,子宫内膜细胞上清液中的IL-1β、TNF-α浓度无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);而在在位及异位内膜细胞的上清液中,IL-1β、TNF-α浓度在LPS组最高,明显高于对照组及LPS+PDTC组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。 3.建立SD大鼠内异症模型,尾静脉注射NF-κBASODN,观察NF-κB ASODN对SD大鼠内异症建模成功率、异位病灶变化。并采集异位病灶,用RT-PCR方法检测大鼠内异症模型异位内膜TNF-αmRNA的表达变化。结果显示:(1)NF-κB ASODN干预治疗后,与未干预组及对照组相比,大鼠内异症模型的成模率明显降低,差异有显著统计学意义(P<0.01),异位病灶的体积也明显减小,差异有显著统计学意义(P<0.01);且NF-κB ASODN干预治疗后,异位病灶的改变随时间的延长更显著,第8周异位病灶的体积较第4周明显缩小,差异有统计学意义(P<0.05);而对照组和干预组的异位病灶则随时间的延长而明显增大,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)NF-κB ASODN组与未干预组及对照组比较,TNF-αmRNA的表达强度显著减弱,差异有显著统计学意义(P<0.01);未干预组及对照组相比,TNF-αmRNA的表达强度无明显变化,差异无明显统计学意义(P>0.05)。 结论 (1) NF-κB在子宫内膜异位症患者的在位及异位的内膜中有异常高表达,而在正常子宫内膜组织中微弱表达。 (2) NF-κB的表达无月经周期性改变且主要在内异症的早、中期参与作用。 (3) NF-κB与VEGF、ICAM、MMP-9、Bcl-2成正相关,说明NF-κB可能通过上调VEGF、ICAM、MMP-9、Bcl-2的表达而在子宫内膜异位症的发病机制中起重要作用。 (4) NF-κB蛋白在在位及异位子宫内膜细胞中有高表达,LPS可使在位及异位子宫内膜细胞的NF-κB蛋白表达增高,使IL-1β、TNF-α的浓度也显著升高,PDTC可抑制此作用。说明NF-κB做为关键性的调控因子,可能对IL-1β、TNF-α以及其它细胞因子起着中枢样调控作用。 (5)用NF-κB ASODN干预治疗大鼠子宫内膜异位症模型后使成模率明显降低,异位病灶萎缩,TNF-αmRNA表达也显著降低。说明用NF-κB反义寡核苷酸抑制治疗内异症模型有效,进一步证实NF-κB与内异症的发病机制有密切关系。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 魏文彬;;肺子宫内膜异位症1例报告[J];国外医学.内科学分册;1982年08期
2 张惠南;;胸膜子宫内膜异位症引起气胸1例[J];江苏医药;1986年10期
3 李长旻;田(岂页);;子宫内膜异位症[J];云南医药;1987年03期
4 程志刚;;卵泡生长数据超声的线性回归分析:子宫内膜异位症病人卵泡生长异常的证据[J];国外医学.计划生育分册;1990年01期
5 孙加正;付先林;;人工流产术与子宫内膜异位症[J];中国妇幼保健;1991年01期
6 包胜英;;子宫内膜异位症和子宫腺肌病的诊断[J];中国临床医生;1992年12期
7 ;女性生殖器其他疾病[J];国外科技资料目录(医药卫生);1999年08期
8 王惠珍;;马鞭草治疗子宫内膜异位症[J];中医杂志;2001年06期
9 周红辉,李亚里;基因芯片技术在子宫内膜异位症研究中的应用[J];中国康复理论与实践;2005年03期
10 胡金蓉;何雯;王月芳;;手术切口瘢痕子宫内膜异位症5例报道[J];实用妇产科杂志;2006年01期
11 尚云;吕卫琴;杜淑静;;剖宫产术后腹壁切口子宫内膜异位症12例临床分析[J];实用医技杂志;2006年02期
12 张建华;崔利娜;陶志敏;张素贞;;孕三烯酮治疗子宫内膜异位症伴不孕术后的疗效观察[J];医学信息;2006年06期
13 蒋振兰;颜琼程;;输卵管结扎防治子宫内膜异位症术后复发疗效观察[J];中国基层医药;2006年12期
14 尚慧玲;李光仪;;散结镇痛胶囊治疗子宫内膜异位症疗效观察[J];中国中西医结合杂志;2007年01期
15 娄建英;;剖宫产术后腹壁切口子宫内膜异位症17例[J];中国生育健康杂志;2008年02期
16 杨红利;;会阴侧切伤口处发生子宫内膜异位症的预防[J];中国社区医师(医学专业半月刊);2008年17期
17 袁源;彭旭菲;游炜;;剖宫产术后腹壁切口子宫内膜异位症8例分析[J];社区医学杂志;2009年06期
18 孙怡;;子宫内膜异位症术后孕三烯酮辅助治疗临床观察[J];中国社区医师(医学专业);2011年02期
19 季玉光;;怀孕可以让身体更健康[J];解放军健康;2011年02期
20 ;子宫内膜异位症58例分析及治疗探讨[J];广东医学;1975年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 向东方;孙巧璋;梁雪芳;;腹针治疗子宫内膜异位症盆腔疼痛的疗效观察[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
2 李筱梅;;腹壁子宫内膜异位症的彩色多普勒超声诊断[A];中国超声医学工程学会第八届全国腹部超声学术会议论文汇编[C];2010年
3 屈王蕾;董剑达;陈文兵;;盆腔外子宫内膜异位症8年病例临床分析[A];首届沪浙妇产科学术论坛暨2006年浙江省妇产科学学术年会论文汇编[C];2006年
4 路红;钱惠勤;;剖宫产术后腹壁切口子宫内膜异位症27例临床分析[A];2007年浙江省妇产科学围产医学联合学术年会论文汇编[C];2007年
5 陈拯民;;青春期女性如何及早发现和治疗子宫内膜异位症[A];浙江省中西医结合学会生殖医学专业委员会第八次学术年会暨国家级继续教育学习班资料汇编[C];2008年
6 邬巧霞;;腹腔镜手术联合米非司酮治疗子宫内膜异位症的临床研究[A];2011年浙江省妇产科学学术年会暨“妇产科常见疾病的临床研究新进展”学习班论文汇编[C];2011年
7 孟庆芳;曹保利;;腹腔镜联合药物治疗子宫内膜异位症伴不孕70例[A];2010全国中西医结合围绝经期专题学术会议论文集[C];2010年
8 司徒仪;冉青珍;;中药提高子宫内膜异位症模型大鼠妊娠功能的研究[A];全国第六届中西医结合妇产科学术会议论文及摘要集[C];2002年
9 马彩虹;;子宫内膜异位症合并不孕[A];全国第三届不育症暨保留生育功能微创手术研讨会论文集[C];2008年
10 聂永新;;化瘀消异汤治疗子宫内膜异位症78例[A];全国第六届中西医结合妇产科学术会议论文及摘要集[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 林素芬;子宫内膜异位症近20年中医临床文献研究[D];广州中医药大学;2013年
2 陈琼华;脂氧素对子宫内膜异位症抑制作用的研究[D];华中科技大学;2011年
3 郭广宏;子宫内膜异位症相关生物标志研究及辅助诊断模型的建立[D];中国人民解放军军医进修学院;2013年
4 江秀秀;水通道蛋白在子宫内膜异位症的表达及子宫内膜细胞迁徙中的作用[D];浙江大学;2010年
5 宋楠;子宫内膜异位症疼痛与瞬时受体电位辣椒素亚型-1表达的研究[D];中国协和医科大学;2010年
6 章蓉娅;子宫内膜异位症病灶组织克隆性的研究[D];北京协和医学院;2009年
7 戴玥;不同气腹介质及作用时间对子宫内膜异位症大鼠模型异位灶影响的分子机制研究[D];第二军医大学;2010年
8 宋淑芳;来曲唑治疗大鼠子宫内膜异位症模型的实验研究[D];天津医科大学;2011年
9 张硕;子宫内膜异位症合并不孕相关研究及重组人促黄体生成素对辅助生育结局的影响[D];中国人民解放军医学院;2013年
10 王宇非;丹参酮ⅡA对体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细胞粘附作用的影响[D];黑龙江中医药大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 翟爱丽;羟基红花黄色素A对体外培养子宫内膜异位症在位内膜细胞增殖及细胞因子表达的影响[D];河北医科大学;2010年
2 李艳;痛可舒治疗子宫内膜异位症的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 史梅莹;葫芦巴丸加减治疗子宫内膜异位症腺肌病痛经及盆腔痛临床研究[D];北京中医药大学;2010年
4 李绪丽;三萜皂苷对大鼠子宫内膜异位症抑制作用的实验研究[D];河北医科大学;2011年
5 李巧时;卵巢型子宫内膜异位症保守手术治疗后复发的临床分析[D];大连医科大学;2010年
6 余峥;姜黄素抑制子宫内膜异位症雌激素生成的实验研究[D];湖北中医药大学;2010年
7 杨洋;89例特殊部位子宫内膜异位症的临床分析[D];吉林大学;2010年
8 兰丽芳;35例腹壁子宫内膜异位症临床分析[D];广西医科大学;2011年
9 张宗敏;卵巢子宫内膜异位症复发因素分析及内异停方预防其复发的临床研究[D];南京中医药大学;2010年
10 田滢舟;补肾活血方修复在位内膜缺陷治疗子宫内膜异位症不孕的临床研究[D];广州中医药大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘晓芹;恼人的子宫内膜异位症(之三)[N];中国人口报;2004年
2 指导专家 广州医学院第一附属医院妇产科主任 张晓薇博士;痛经 警惕子宫内膜异位症[N];医药导报;2009年
3 士平;子宫内膜异位症不可轻视[N];中国妇女报;2000年
4 ;哪些疼痛需警惕子宫内膜异位症[N];中国妇女报;2003年
5 刘正英;“四痛”信号:可知子宫内膜异位症[N];大众卫生报;2003年
6 舒楚强;子宫内膜异位症与不孕[N];大众卫生报;2004年
7 史建纲;如何根治子宫内膜异位症[N];甘肃日报;2003年
8 兰州现代中医药研所 史建钢;子宫内膜异位症能否根治?[N];甘肃日报;2004年
9 ;子宫内膜异位症能否不手术??[N];健康时报;2004年
10 上海交通大学附属第六人民医院中医科主任医师 霍清萍;谈谈子宫内膜异位症[N];家庭医生报;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978