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亚胺培南和美罗培南体外诱导铜绿假单胞菌耐药的实验研究

曹伟  
【摘要】: 目的: 体外诱导铜绿假单胞菌亚胺培南、美罗培南耐药;分析两种抗生素诱导耐药情况有无差异及对其他常用抗生素的敏感率有无变化;检测两种诱导耐药株高突变性菌株的检出情况并比较有无区别。 方法: 1.所有菌株均经MicroScan WalkAway-96微生物分析仪鉴定,使用常规药敏试验(K—B法)筛选出亚胺培南和美罗培南敏感菌株,E-test试验检测其MIC值。 2.耐药菌株诱导试验:采用低浓度肉汤传代诱导法,将细菌在含1/4 MIC浓度亚胺培南或美罗培南的脑心浸液肉汤中连续传代培养25次,筛选出耐药株并用E-test试验检测其MIC值,同时采用K—B法检测耐药株对其他抗生素的敏感性。 3.高突变性菌株检测:将诱导耐药株稀释成不同浓度的菌液,分别接种于含或不含300ug/ml利福平的Luria-Bertani(LB)琼脂上,培养48h后计数菌落数,计算突变频率。如果待测菌株突变频率比参考菌株高20倍以上,则认为该菌株为高突变株。 结果: 1.在80株铜绿假单胞菌中,经亚胺培南诱导,有56株变为耐药,诱导率为70.0%;经美罗培南诱导,有44株变为耐药,诱导耐药率为55.0%,两者诱导率之间有差别(P<0.05)。 2.诱导后所有菌株对诱导抗生素本身MIC均有不同程度升高,同时对其他抗生素的敏感率均有下降。亚胺培南诱导耐药株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的敏感率均在50%以下,而美罗培南诱导耐药株均高于70%;亚胺培南诱导耐药株对阿米卡星和环丙沙星的敏感率为85.7%和75.0%,而美罗培南诱导耐药株分别为100%和93.75%。 3.在56株亚胺培南诱导耐药株中,有12株为高突变株,占21.4%;在44株美罗培南诱导耐药株中,有6株为高突变株,占13.6%,两者高突变检测率之间有差别(P<0.05)。 结论: 1.亚胺培南和美罗培南在体外均可诱导铜绿假单胞菌耐药,亚胺培南的诱导耐药率显著高于美罗培南。 2.诱导耐药株对诱导抗生素本身MIC有不同程度升高,亚胺培南诱导耐药株对β-内酰胺类抗生素和环丙沙星的敏感率下降显著高于美罗培南诱导耐药株,但阿米卡星的敏感率下降无明显区别。 3.亚胺培南诱导耐药株和美罗培南诱导耐药株均可检测出高突变菌株,但检出率不同,前者显著高于后者。


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