收藏本站
收藏 | 论文排版

环氧化酶-2及血管内皮生长因子在慢性粒细胞性白血病中的表达特点和意义研究

龚凡杰  
【摘要】: 研究背景:血管增生是肿瘤发生发展中的重要特征。多种正性或负性调控因子参与肿瘤血管生成的调节,其中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)是其中关键的正调节因子。两者不仅能促进血管内皮细胞分裂、增加肿瘤血管通透性,同时有促肿瘤细胞增殖,抗凋亡及加强肿瘤耐药等作用。 环氧化酶(cyclooxygenase,COX)是人体前列腺素(PGs)合成过程中重要的限速酶,有COX-1和COX-2两种异构体。COX-1在大多数细胞中呈稳定表达,维持机体正常的生理功能;而COX-2则在各种病理过程中特别是肿瘤发生发展过程中呈诱导性表达。有研究表明,多数实体瘤病理组织中,COX-2存在过度表达,其表达水平与肿瘤的发生、进展和预后关系密切。抑制COX-2表达能有效抑制肿瘤血管生成、诱导肿瘤细胞凋亡并增强肿瘤细胞对化疗药物的反应。 血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)是生长因子家族中的一员。正常生理条件下,VEGF在机体组织中呈低水平表达,以旁分泌形式调节血管内皮细胞生长。恶性肿瘤细胞能大量合成并分泌VEGF,通过旁分泌方式促进肿瘤血管增生,通过自分泌方式刺激肿瘤细胞自身增殖、抑制细胞凋亡,在肿瘤的发生发展过程中发挥作用。VEGF在肿瘤中的表达受多种因素的调节,其中,COX-2能催化花生四烯酸产生代谢物PGE_2正向调节VEGF的合成与分泌。在体外实验中,COX-2与VEGF的表达有明显的相关性。抑制COX-2的表达、降低PGE_2水平或采用VEGF的特异性抑制剂均能有效降低VEGF的表达水平,减少内皮分裂、抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡并提高肿瘤细胞对药物的敏感性。 慢性粒细胞性白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是一种造血干细胞恶性克隆性疾病。随着人们对CML发病机制的了解以及基因靶向药物——格列卫在CML治疗中的应用,CML的临床疗效已有了明显的改善,但远期效果仍不满意;对于进展和急变期慢粒患者,目前仍缺乏有力的治疗方案。因此,更加深入的揭示CML的发病机制,寻找有治疗意义的分子靶点,制定更加适合有效的治疗方案是当前迫切需要解决的问题。已有研究发现CML患者骨髓微血管密度异常增高,其白血病细胞中存在COX-2或VEGF的异常表达,但对于COX-2或VEGF在CML临床病程中表达特点的研究仍然缺乏。此外,对于两者的异常表达在CML临床中的意义、以及在CML患者骨髓单个核细胞中共表达的相关性和作用机制,国内外鲜有研究报道。 本研究采用流式细胞仪技术、蛋白印迹(Western-Blot)、实时荧光定量PCR(Real time-PCR)及COX-2酶活性测定等方法从不同的角度观察了CML患者骨髓单个核细胞中COX-2的表达特点,分析COX-2的表达水平与CML患者多个临床参数之间的关系及其临床意义;定量测定血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA在CML患者骨髓单个核细胞中的表达,探讨其临床价值;研究VEGF与COX-2在CML患者骨髓单个核细胞中表达的相关性,并进一步探讨COX-2与VEGF在CML肿瘤发生发展过程中可能的相互作用机制。 第一部分COX-2基因/蛋白/活性在CML患者骨髓单个核细胞中的表达分布特点及临床意义 目的:从基因和蛋白水平测定COX-2在CML患者骨髓单个核细胞中表达的特点;分析COX-2表达水平与CML临床参数间的关系及其临床意义。方法:收集60例不同病程分期CML患者及15例骨髓无恶性病变的对照骨髓标本,获取骨髓中的单个核细胞,采用流式细胞术、Western-Blot、实时荧光定量PCR及COX-2酶活性测定等技术对骨髓单个核细胞内COX-2的表达进行检测,比较CML患者与对照之间及不同病期CML患者之间COX-2表达的差异;比较骨髓单个核细胞COX-2表达水平与对应的临床参数间的关系。结果:(1)与对照比较,CML患者骨髓单个核细胞中COX-2阳性细胞百分率、阳性细胞荧光强度、COX-2蛋白含量、COX-2mRNA转录拷贝数及酶生物活性均呈显著性升高(P<0.05);(2)不同病期CML患者骨髓单个核细胞中COX-2表达水平无显著性差异(P>0.05);(3)初治CML患者骨髓单个核细胞COX-2蛋白表达水平与病人年龄呈负相关(P=0.008),与患者脾脏大小(P=0.028)、外周血白细胞数呈正相关(P=0.017);(4)骨髓单个核细胞中COX-2高表达患者进入CML加速和急变期的时间较COX-2低表达者明显缩短(P<0.05)。结论:CML患者骨髓单个核细胞存在COX-2异常表达,COX-2的表达水平与CML患者的肿瘤负荷相关,COX-2高表达的CML患者的慢性期缩短,更易进入加速期或急变期。 第二部分VEGF蛋白及mRNA在CML患者骨髓单个核细胞中的表达状态及意义 目的:观察VEGF在CML患者骨髓单个核细胞中表达的状态并分析其临床意义。方法:收集60例不同病期CML患者及15例骨髓无恶性病变的对照骨髓标本,获取骨髓中的单个核细胞,采用流式细胞术及实时荧光定量PCR测定技术对骨髓单个核细胞内VEGF蛋白及mRNA的表达进行检测,比较CML患者与对照之间及不同病期CML患者之间VEGF表达的差异;比较患者骨髓单个核细胞VEGF表达水平与其对应的临床参数间的关系。结果:(1)与对照骨髓标本比较,CML患者骨髓单个核细胞中VEGF阳性细胞百分率、阳性细胞荧光强度、mRNA转录拷贝数均明显升高(P<0.05);(2)不同病期CML患者骨髓单个核细胞中COX-2表达水平无显著性差异(P>0.05);(3)初治CML患者骨髓单个核细胞VEGF蛋白表达水平与病人年龄呈负相关、与患者脾脏大小、外周血白细胞数及骨髓粒红比呈正相关(P<0.05);(4)VEGF高表达患者进入CML加速或急变期的时间明显短于VEGF低表达者。结论:VEGF在不同时期CML患者骨髓中均存在异常高表达,VEGF的表达水平与CML患者的肿瘤负荷相关,高表达的VEGF对CML的预后判定有一定的临床意义。 第三部分COX-2与VEGF在CML患者骨髓单个核细胞中表达的相关性及临床意义 目的:观察COX-2及VEGF在不同病期CML患者骨髓单个核细胞中共表达的状态;比较COX-2与VEGF在CML中表达的相关性,揭示两者在CML疾病发生发展中的相互作用及与临床的相关性。方法:对前两部分收集并测定的患者COX-2及VEGF的数据进行进一步分析,比较不同病期CML患者骨髓单个核细胞中VEGF与COX-2蛋白及基因的共表达状态,确定两者的相关性并探讨两者在CML发病过程中的相互作用及意义。结果:不同病期CML患者均存在VEGF与COX-2高表达,各组间表达水平无明显差异;COX-2与VEGF在蛋白及基因表达水平上呈显著正相关(P<0.05)。结论:COX-2与VEGF在不同病期的CML患者中呈共同高表达;COX-2与VEGF在CML的发病过程中可能存在着相互作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 黄强,孙酬经,夏晓华,周永列,林明,汪涟明,钱美华,蓝建平,王文松,杨天新;骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞免疫表型的测定[J];浙江医学;1999年06期
2 和虹!300020天津,邵宗鸿!300020天津,曹增!300020天津,田鹏!300020天津,崔文!300020天津,刘鸿!300020天津,宋鲁燕!300020天津,孙娟!300020天津,贾海蓉!300020天津,储榆林!300020天津,钱林生!300020天津,杨天楹!300020天津;骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验[J];中华血液学杂志;2000年10期
3 孔佩艳,罗成基,郭朝华,周燕虹,施炎,邹仲敏;不同条件下体外扩增造血细胞促造血恢复能力的比较[J];第三军医大学学报;2002年08期
4 王荣朝;吴雨岗;;小鼠骨髓来源树突状细胞对T细胞的活化作用[J];江苏医药;2008年03期
5 刘体峰;;骨髓Coombs分型在血细胞减少症中的意义[J];中国社区医师(医学专业);2010年28期
6 吕菁君,林国生,李庚山;骨髓单个核细胞自体移植促进心脏血管再生[J];中华胸心血管外科杂志;2004年02期
7 黄红铭,徐瑞容,丁润生,陆德炎,刘红;骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞内负调控因子的研究[J];中国实验血液学杂志;2004年05期
8 刘文亮,尹邦良,喻风雷,胡野荣,陈晓凤;骨髓单个核细胞缺血组织局部移植对血运重建的影响[J];中南大学学报(医学版);2004年05期
9 高连如,朱智明,王志国,费宇行,徐洪涛,李贤峰,陈宇,田海涛,王浩,曹毅,朱家瑞,贺声,黄友章,张宁坤,王丽华,张军,张云山,沈建良,刘惠亮,丁青艾,杨平地,杨晔;经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植修复梗死心肌的临床研究[J];中国介入心脏病学杂志;2004年05期
10 罗梅宏,孙伟正;补髓生血颗粒对慢性再障患者VLA-4/CD_(49d)及c-kit/CD_(117)的影响[J];中医药信息;2005年04期
11 杜晓梅,谭明灯,梁自文,陈兵,流沙,蔡红卫;自体骨髓单个核细胞移植治疗糖尿病足15例[J];第三军医大学学报;2005年17期
12 万荣,聂广;骨髓干细胞:肝细胞移植的新来源[J];中国中西医结合消化杂志;2005年05期
13 吴沃栋;梁国华;李文杰;陈希明;卢雄;潘倩莹;黎萍;孙筱放;陈安薇;陈次滨;;自体骨髓单个核细胞经冠状动脉移植治疗扩张型心肌病1例报告[J];现代医院;2005年12期
14 尹荣;李忠东;董国华;钱建军;许飚;景华;;自体骨髓单个核细胞移植治疗风湿性心脏病可行性研究[J];山东医药;2006年28期
15 辛世杰;宋清斌;胡海地;张健;秦岭峰;张赞松;张平;罗英伟;丁奎;白明欣;段志泉;;自体骨髓单个核细胞移植治疗42例严重慢性下肢缺血性疾病[J];中国医科大学学报;2006年06期
16 高连如;王志国;田海涛;朱智明;费宇行;徐洪涛;陈宇;朱家瑞;贺声;张宁坤;丁青艾;杨晔;;经冠状动脉骨髓单个核细胞移植治疗缺血性心脏病二年随访[J];中华医学杂志;2007年10期
17 郑奇军;刘维永;易定华;俞世强;刘洋;欧阳辉;程亮;蔡振杰;;骨髓内皮祖细胞EPCs两种分离方法及其对比研究[J];第四军医大学学报;2008年04期
18 孙笑非;冯雪梅;;骨髓单个核细胞治疗坏死股骨头坏死实验研究[J];辽宁医学院学报;2008年02期
19 金世柱;韩明子;孙立影;耿莹;洪钰;;粒细胞集落刺激因子促进自体骨髓单个核细胞向急性肝损伤小鼠肝脏迁移的实验研究[J];胃肠病学和肝病学杂志;2008年03期
20 孙立影;韩明子;金世柱;耿莹;祁金锋;穆丽雅;;基质细胞衍生因子1对骨髓单个核细胞向肝脏迁移分化的影响[J];胃肠病学和肝病学杂志;2008年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郑水儿;金洁;童向民;钱文斌;薛永权;;干扰素-α联合GM-CSF诱导慢性粒细胞白血病细胞向树突状细胞分化[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年
2 肖佩芳;柴忆欢;何军;邵雪军;何海龙;王易;李桢萍;李建琴;李捷;卢俊;吕慧;;cAMP反应元件结合蛋白在儿童急性髓细胞白血病中的表达及其意义[A];中国抗癌协会第七届全国小儿肿瘤学术会议论文汇编[C];2007年
3 李安民;张志文;郭晓明;;自体外周血骨髓单个核细胞脑移植治疗精神发育迟滞[A];中国医师协会神经外科医师分会第六届全国代表大会论文汇编[C];2011年
4 黄榕翀;姚康;李延林;章轶琦;徐世坤;施鸿毓;潘翠珍;杨珊;张少衡;葛雷;牛玉宏;张峰;钱菊英;邹云增;葛均波;;经冠状动脉骨髓单个核细胞移植治疗原发性扩张型心肌病的安全性与疗效近期观察[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年
5 施益芬;俞康;;苯及代谢物对骨髓细胞拓扑异构酶Ⅱα表达和活性的影响[A];中华医学会第11届全国内科学术会议论文汇编[C];2007年
6 杨博华;吴鲁辉;秦建辉;朱龄群;;自体骨髓单个核细胞移植与中药合用治疗糖尿病下肢动脉缺血[A];全国中西医结合周围血管病专题研讨会论文汇编[C];2005年
7 姚康;黄榕翀;邹云增;李延林;杨军;杨珊;葛雷;钱菊英;牛玉宏;章轶琦;崔洁;陈曙光;施鸿毓;孙爱军;葛均坡;;自体骨髓单个核细胞二次移植时间间隔对心肌梗死后存活心肌和心功能的影响[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年
8 丁凯阳;白霞;胡晓慧;岑建农;董宁征;阮长耿;;VEGF-C及其受体在慢性髓系白血病肿瘤细胞表达及其临床意义[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年
9 黄榕翀;姚康;邹云增;钱菊英;葛雷;章轶琦;牛玉宏;史剑慧;徐世坤;李延林;施鸿毓;陈曙光;孙爱军;葛均波;;~(201)T1心肌灌注显像在骨髓单个核细胞移植治疗陈旧性前壁心肌梗死患者中的价值[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年
10 孙勇新;夏利民;赵强;;自体骨髓单个核细胞血管内移植对动脉粥样硬化斑块的影响[A];中华医学会第七次全国胸心血管外科学术会议暨2007中华医学会胸心血管外科青年医师论坛论文集心血管外科分册[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 尚全良;同种异体骨髓单个核细胞肝内移植治疗急性肝损伤的磁共振扩散成像实验研究[D];中南大学;2009年
2 张云强;自体骨髓单个核细胞移植治疗心力衰竭[D];天津医科大学;2009年
3 唐洁;经冠脉自体骨髓单个核细胞移植修复梗死心肌的实验观察[D];天津医科大学;2008年
4 张林;冠状动脉旁路移植术患者骨髓和循环祖细胞的临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
5 孙冬冬;骨髓单个核细胞移植及丹参酮IIA治疗糖尿病伴缺血性心脏病的疗效及机制研究[D];第四军医大学;2010年
6 金世柱;肝细胞生长因子联合骨髓单个核细胞移植促进小鼠急性损伤肝脏再生[D];吉林大学;2011年
7 崔明亮;心内膜下移植骨髓单个核细胞和间充质干细胞对猪急性心肌梗死疗效的实验研究[D];第四军医大学;2013年
8 王佚;mdr1基因在兔VX2肝癌化疗中骨髓保护及治疗作用的研究[D];重庆医科大学;2004年
9 孙林;自体骨髓单个核细胞移植治疗猪急性心肌梗死的实验研究[D];昆明医学院;2007年
10 刘文亮;骨髓单个核细胞局部移植促进大鼠缺血后肢血管再生实验研究[D];中南大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 马军;甲状腺激素T3对骨髓单个核细胞增殖及凋亡的影响[D];郑州大学;2010年
2 王太成;异体大鼠骨髓单个核细胞胰岛细胞移植治疗糖尿病实验研究[D];新疆医科大学;2010年
3 胡晓燕;自噬相关基因Beclinl和MAPLC3在急性白血病骨髓单个核细胞中的表达及其意义[D];兰州大学;2011年
4 靳芳莉;自体骨髓单个核细胞移植治疗失代偿肝硬化的疗效观察[D];郑州大学;2012年
5 胡国梁;骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死的实验和临床研究[D];第二军医大学;2005年
6 周芳;自体骨髓间充质干细胞和单个核细胞移植治疗冠心病的临床研究[D];南京医科大学;2005年
7 李海嵘;自体骨髓单个核细胞移植快速右室起搏诱导心力衰竭犬心脏功能变化[D];天津医科大学;2010年
8 黄晓宇;骨髓单个核细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心室重构的影响[D];郑州大学;2011年
9 陈一欢;自体骨髓单个核细胞移植治疗慢性充血性心衰的实验研究[D];苏州大学;2006年
10 卢长青;自体骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死后心功能不全的临床观察[D];郑州大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 ;发挥中西医结合优势 开拓冠心病治疗新领域[N];中国医药报;2003年
2 董志翔;细胞移植治疗心衰成功[N];科技日报;2003年
3 本报记者 王雪敏;缺血性心肌病:外科医生能做什么[N];医药经济报;2010年
4 记者 傅冬红;甲基转移酶活性增高是急性白血病高发现象[N];健康报;2001年
5 本报记者 王雪敏;干细胞治疗心脏病:可致心律失常?[N];医药经济报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978