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载阿伦磷酸钠丙烯酸骨水泥的生物相容性研究

王上元  
【摘要】: 目的 制备载阿伦磷酸钠丙烯酸骨水泥并进行生物相容性评价。 方法 本实验均根据中华人民共和国国家标准GB/T16886.1-2001的规定,按外科植入物的生物相容性评价项目进行。 1、试验模件的制备:按设计要求,分为5种不同配比比例,按每50g PMMA粉末中加入10mg、50mg、100 mg、500 mg、1000 mg阿伦磷酸钠,聚合固化后制作成标准载阿伦磷酸钠骨水泥模件,包装灭菌备用。 2、细胞毒性试验(体外)和细胞增殖:将各试验组模件以培养液浸提24h作为浸提液备用。取增殖期成骨样细胞MG-63,按每孔1×10~4个接种到96孔板内,加浸提液共同培养24 h,MTT比色法检测吸光度值,计算细胞相对增殖率并进行细胞毒性分级(细胞毒性级0或1级为合格)。 3、粘附试验:成骨样细胞MG-63以10~5个/ml接种在含粘附标本的6孔板(每组1孔),培养3天后取出标本,PBS洗涤2次,2%冷戊二醛和1%锇酸固定、梯度酒精脱水,临界点干燥,喷金后行电镜扫描,观察细胞形态和数目。 4、植入后局部反应试验:选用成年大白兔15只,随机数字表法分为5组,每组3只,在家兔背部肌肉内植入空白丙烯酸骨水泥模件,相对位置分别植入各试验组骨水泥模件。术后1,4,12周分别处死动物取出标本,观察材料周围组织的炎症反应及纤维包膜的形成情况。 5、皮内刺激试验:实验模件用生理盐水浸提24h消毒备用。选用成年大白兔5只,脊柱区备皮。沿脊柱两侧对称位置分别注入生理盐水和各组浸提液0.2ml,并于4h,24h,48h,72h观察皮肤刺激情况并分级。 6、全身急性毒性试验:实验模件用生理盐水浸提24h消毒备用。选用KM种小鼠30只,随机分为6组,每组5只。实验组小鼠由尾静脉恒速注入浸提液,剂量50ml/Kg,对照组则注入同剂量生理盐水,并于4h,24h,48h,72h观察小鼠有无中毒反应并分级。 结果 细胞毒性试验结果显示,所设5个试验组的细胞毒性分级均属于0-1级,符合要求;粘附试验可见标本上细胞贴附良好,显示实验组对成骨样细胞无毒性,符合生物相容性要求;肌内埋植试验显示术后1周包膜形成不完整,炎症分级为3级,4周和12周结果显示,包膜完整形成,无明显增厚,炎症分级均为1-0级,符合国家标准要求;皮内刺激试验显示,注射后即刻、24、48及72h,对照组和各试验组注射部位均未见红斑、水肿发生,表明各试验组对皮肤无刺激作用;急性毒性试验显示在72h观察期间,对照组和样品组动物一般状况良好,均未见毒性表现,无动物死亡,符合要求。 结论 在50g骨水泥粉末中阿伦磷酸钠的加入量不超过1000mg制备的复合骨水泥无成骨细胞毒性,组织相容性好,无全身急性毒性反应,具有良好的生物相容性。


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