收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

siRNA对子宫平滑肌细胞NMBR干扰作用的实验研究

吴梅婷  
【摘要】: 目的: 探索小分子干扰RNA对小鼠子宫平滑肌细胞中神经介素B受体(NMBR)基因表达的影响,为NMBR后续研究提供工具。 方法: 采用分娩期小鼠子宫平滑肌细胞进行原代培养,并通过免疫细胞化学及免疫荧光方法进行鉴定;采用免疫细胞化学法及实时定量荧光PCR对小鼠子宫平滑肌细胞转染前后NMBR基因及蛋白表达进行测定,并进行细胞毒性检测。 结果: 1.原代细胞培养:妊娠期小鼠子宫平滑肌细胞经原代培养生长状态良好,呈典型长梭形,经免疫细胞化学及免疫荧光证实富含α—肌动蛋白。 2.siRNA有效干扰片段筛选、确定: 1)转染效率:所有细胞均被成功传染,即RNAi转染效率达90%以上,可满足实验需要; 2)细胞毒性实验:结果显示3条RNAi作用时间为24h-72h之间,对细胞有一定毒性作用,干预1组、干预2组细胞在72h时段均存活细胞百分比维持在80%以上,可满足实验需要; 3)干扰效果:结果显示三个干预组的基因表达的抑制率分别为59.4%,94.2%,92.8%。 4)有效siRNA确定:对细胞毒性最小且有明显干预作用的RNAi为干预2组(RNAi-987),其RNAi序列为NMBR-987Sense:5-GCUUUAGGAAGCACUUCAATT-3Anti-sense:5-UUGAAGUGCUUCCUAAAGCTT-3 结论: 特异性的SiRNA可有效降低小鼠子宫平滑肌细胞中NMBR表达,为NMBR的后续研究提供实验基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 梁树辉,丁杰,黄大伟,潘阳林,林涛,党冬梅,时永全,吴开春;胃癌细胞AGS中KDR的表达对人脐静脉内皮细胞生物学行为的影响[J];现代肿瘤医学;2005年02期
2 倪勤;RNA干扰技术防治病毒性肝炎的研究[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2003年04期
3 李光明,谢青,史毅,李定国,金由辛;siRNA对HSC结缔组织生长因子的抑制作用[J];上海第二医科大学学报;2005年02期
4 燕春艳;RNA干扰技术研究进展[J];实用医药杂志;2003年09期
5 马鹏鹏,葛晔华,郭睿,马静,陈平,薛社普,韩代书;小分子干扰RNA(siRNA)表达载体沉默靶基因的研究[J];解剖学报;2004年06期
6 郭述良,罗永艾;RNA干扰及其在呼吸系统疾病研究中的应用[J];国外医学.内科学分册;2004年12期
7 赵洪波,张嘉宁;RNA干扰技术的应用[J];大连医科大学学报;2003年04期
8 范怡敏,耿飞,吴兴中;RNAi的机制及RNAi技术的应用[J];医学综述;2004年04期
9 王占黎,卢景芬,张亮仁,张礼和;RNA干扰与药物的研究进展[J];国外医学.药学分册;2004年04期
10 熊洁,陈宝安;RNA干扰技术在白血病研究中的应用前景[J];国外医学.肿瘤学分册;2004年11期
11 胡晓霞,李力;RNA干扰技术及在妇科肿瘤研究中的应用[J];国外医学.妇产科学分册;2005年02期
12 薛利军;siRNA对培养细胞内HCV RNA复制子的清除作用[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2003年05期
13 周幼芬,陈建伟,范挽亭,张昊昊,廖继东,胡海燕;RNA干扰技术及其应用[J];现代临床医学生物工程学杂志;2004年05期
14 李宁;siRNA介导RNAi的研究进展[J];国外医学.分子生物学分册;2003年02期
15 严淑贤,廖康煌;RNA干预:一项防治艾滋病的新策略[J];国外医学.皮肤性病学分册;2003年06期
16 李月敏,姜明红,钱其军,宋三泰;RNAi技术在病毒性疾病和肿瘤治疗中的应用前景[J];军事医学科学院院刊;2004年03期
17 康春生,浦佩玉,王广秀,李彦和,董伦,王虎;靶向表皮生长因子受体的小分子干扰RNA抑制TJ905人脑胶质瘤细胞增殖和侵袭的实验研究[J];中华医学杂志;2004年18期
18 陈波斌,范华骅,林果为,袁正宏,陆华中,高砾,刘嬿;siRNA诱导K562细胞凋亡的实验研究[J];中华血液学杂志;2004年12期
19 翟荣林,王国斌,夏泽峰;c-myc靶向小干扰RNA诱导乳腺癌细胞凋亡的作用[J];中华实验外科杂志;2005年06期
20 王汉森,张玉稚,潘虹,吴希如;RNA干扰技术及其在神经科学研究中的应用[J];中国神经科学杂志;2003年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 邓清华;刘国文;刘磊;王建国;朱晓岩;李小兵;王哲;;siRNA特异性抑制犊牛原代肝细胞SREBP-1c基因的表达[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(上册)[C];2011年
2 季爱民;苏丹;车鸥;李文适;孙靓;张忠义;杨彬;;壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究(英文)[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
3 黄伟;吕明;金明姬;杨长青;高钟镐;;mPEG-PCL-g-PEI聚合物的合成及其siRNA递送性能[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
4 陈宇;郑海涛;杨力建;陈少华;沈琦;刘思初;李萡;李扬秋;;靶向抑制PPP2R5C基因的siRNA的筛选[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
5 刘政;邱广斌;;MYCT-1基因特异的siRNA对GES-1细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
6 陈卫华;王跃闽;;Cb1-b特异性siRNA载体的筛选验证[A];华东六省一市泌尿外科学术年会暨2011年浙江省泌尿外科、男科学学术年会论文汇编[C];2011年
7 刘芳蕾;周勇;应可净;;肺癌PLK1基因多态性及siRNA干预的研究[A];2011年第三十三届浙江省呼吸系病学术年会暨呼吸疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
8 薛利军;曹明媚;秦照玲;潘欣;戚中田;;siRNA抑制结核分枝杆菌侵袭相关基因mcela在体外培养的人细胞内的表达[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
9 章如新;;P物质siRNA在变应性鼻炎中的作用机制研究[A];世界中联耳鼻喉口腔专业委员会换届大会及第三次学术年会暨中华中医药学会耳鼻喉科分会第十七次学术交流会暨广东省中医及中西医结合学会耳鼻喉科学术交流会论文汇编[C];2011年
10 李平;刘苹;陈星云;赵艳;彭艳;陈磊;周元国;;大鼠c-ski基因siRNA真核表达载体的构建及其在成纤维细胞中的干扰效果观察[A];重庆市生物化学与分子生物学学术会议论文摘要汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 胡平方;纤溶酶原激活物抑制剂-1 siRNA治疗实验性肝纤维化[D];第二军医大学;2010年
2 蔡磊;携带Survivin特异性siRNA的完全人源性肝癌单链抗体/鱼精蛋白截短体融合蛋白对肝癌凋亡的影响研究[D];第四军医大学;2010年
3 张伟;H5N1亚型高致病性禽流感病毒siRNA靶向制剂的研究[D];中国协和医科大学;2010年
4 郭炬;siRNA靶向沉默HPA基因对人膀胱癌BIU-87细胞的生物学及HPA相关基因的影响[D];华中科技大学;2011年
5 徐向上;Aptamer-protamine-siRNA复合物在肿瘤靶向治疗中的作用研究[D];华中科技大学;2010年
6 韩璐;豆科植物蒺藜苜蓿发育相关基因[D];山东大学;2010年
7 王哲文;后发性白内障的发病机制研究[D];吉林大学;2006年
8 向飞宇;心衰的机制与干细胞治疗基础研究[D];复旦大学;2009年
9 张彦萍;纤溶酶原激活物抑制剂-1siRNA抗博来霉素诱导的大鼠肺纤维化作用及机制[D];河北医科大学;2011年
10 万黎;Galectin-3特异性siRNA对肺癌肿瘤干细胞生物学功能影响的研究[D];华中科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴梅婷;siRNA对子宫平滑肌细胞NMBR干扰作用的实验研究[D];中南大学;2009年
2 郑亚婷;应用siRNA技术抑制铜绿假单胞菌外膜蛋白OprM表达的研究[D];昆明医学院;2010年
3 贾丽洁;ICP27特异性siRNA抑制HSV-1病毒复制的实验研究[D];郑州大学;2010年
4 付振宇;siRNA沉默HIF-1α基因对人前列腺癌PC3细胞生物学性状的影响[D];苏州大学;2010年
5 韦德芳;利用pSOS-HUS系统筛选靶向乙肝病毒X基因的siRNA的研究[D];重庆医科大学;2010年
6 马婧薇;ASGPR介导的靶向siRNA抑制HBV的复制与表达[D];华中科技大学;2009年
7 方首镕;siRNA干扰MDR1逆转舌癌耐药性表型的实验研究[D];广西医科大学;2011年
8 李杰;抑制PKM2的siRNA协同抑制CCND1的作用机制研究[D];安徽医科大学;2011年
9 王涵;应用siRNA技术下调Survivin抑制鼻咽癌细胞生长的研究[D];昆明医学院;2010年
10 索涛莉;靶向Hsp90β siRNA对Jurkat细胞生长抑制及化疗敏感性影响的研究[D];重庆医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 邹韧;商业性使用学位论文须作者授权[N];中国新闻出版报;2008年
2 ;国防大学学位论文实行“双盲匿名评阅”[N];解放军报;2007年
3 刘海明;仅有“独创声明”还不够[N];大众科技报;2003年
4 李松黄洁 实习生 徐伟伦;百名硕博告“万方”案开审[N];法制日报;2008年
5 本报记者 焦红艳;谁动了我的学位论文著作权?[N];法制日报;2008年
6 余志平;打开功能基因组学与未来治疗学的大门[N];中国医药报;2004年
7 王贤才;学写学位论文[N];健康报;2002年
8 薛子进;研究生的学位论文法律保护问题引争议[N];法制日报;2007年
9 刘庆传;拿什么来为研究生质量把关[N];新华日报;2006年
10 晏 扬;导师不能“师”而不“导”[N];中国教育报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978