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硫化氢延迟预处理对大鼠心肌的保护作用及其机制的研究

唐正国  
【摘要】: 第一章硫化氢延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 目的:观察硫化氢延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。 方法:健康成年Sprague-Dawley雄性大鼠40只,随机分成4组:S组:假手术组,仅开胸并分离左冠状动脉前降支,但不阻断血流150分钟;IR组:缺血再灌注组,行左冠状动脉前降支阻断30分钟,再灌注120分钟;H组:硫化氢预处理组,予以静脉注射NaHS 0.05mg/kg,给药后24h同IR组处理;D组:硫化氢预处理+线粒体KATP通道阻断剂(5-羟葵酸,5-HD)组,缺血前15min静脉注射5-HD5mg/Kg,其它同H组处理。再灌注结束后测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和心梗面积,电镜观察各组心肌细胞超微结构变化。 结果:1.心肌梗死面积变化:与IR组(38.27±5.64%)比,H组(25.40±3.54%)心肌梗死面积减小(P0.05),D组(40.53±5.24%)无明显差异(P0.05)。2.心肌超微结构变化:与IR组比,H组心肌细胞损伤程度减轻,D组无明显差异。4.生化指标变化:与IR组比,H组MDA降低(P0.05),SOD活性增高(P0.05),D组无明显差异(P>0.05)。 结论:硫化氢延迟预处理通过线粒体KATP通道介导,对大鼠缺血再灌注心肌具有保护作用。 第二章硫化氢延迟预处理对大鼠心肌蛋白质组学的研究 目的:采用蛋白质组学技术探讨硫化氢延迟预处理对大鼠心肌保护作用的分子机制。 方法:用双向凝胶电泳法分离生理盐水组(S组)和硫化氢预处理组(H组)24 h后的大鼠心肌组织蛋白质,对双向凝胶电泳(2-DE)图谱分析后找出表达差异的蛋白质,并用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定部分差异蛋白质。 结果:经双向凝胶电泳图谱分析发现,S组的蛋白质点数平均为929±14,H组的蛋白点数平均为906±10。其中差异明显的点有15个,经过质谱分析,初步鉴定出11个蛋白质。这些蛋白质包括能量代谢相关蛋白(果糖二磷酸醛缩酶A)、抗氧化相关蛋白(谷胱甘肽S转移酶,S-腺苷蛋氨酸合成酶)、呼吸链相关蛋白(电子转移黄素蛋白,NADH脱氢酶)及细胞保护相关蛋白(糖原合成酶激酶-3,胱硫醚-γ-裂解酶)。 结论:硫化氢延迟预处理后心肌组织的蛋白表达发生改变,提示硫化氢延迟预处理的心肌保护作用可能与改善能量代谢、抗氧化反应等有关。 第三章硫化氢延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注时谷胱甘肽S转移酶表达的影响 目的:探讨硫化氢延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注时谷胱甘肽S转移酶表达的影响。 方法:健康成年Sprague-Dawley雄性大鼠40只,随机分成4组:S组:假手术组,仅开胸并分离左冠状动脉前降支,但不阻断血流150分钟;IR组:缺血再灌注组,行左冠状动脉前降支阻断30分钟,再灌注120分钟;H组:硫化氢延迟预处理组,予以静脉注射NaHS 0.05mg/kg,给药后24h同IR组处理;D组:硫化氢延迟预处理+线粒体KATP通道阻断剂(5-羟葵酸,5-HD)组,缺血前15min静脉注射5-HD 5mg/Kg,其它同H组处理。再灌注结束后测心肌谷胱甘肽S转移酶(GST)的表达和心梗面积。 结果:1.心肌梗死面积变化:与IR组(38.27±5.64%)比,H组(25.40±3.54%)心肌梗死面积减小(P0.05),D组(40.53±5.24%)无明显差异(P0.05)。2.GST表达变化:与S组比,IR组、H组和D组GST均升高(P0.05),与IR组比,H组GST增高(P0.05),D组无明显差异(P0.05)。 结论:硫化氢延迟预处理对大鼠心肌的保护作用可能与上调心肌谷胱甘肽S转移酶表达有关。


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