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钙通道激动剂Bay K8644在兔肺缺血再灌注损伤中的保护作用

张航  
【摘要】: 目的 探讨Bay K8644预处理对家兔肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。 方法 40只健康成年清洁级大白兔随机分为4组,每组10只。Ⅰ组:假手术组(Sham组);Ⅱ组:缺血再灌注组(I瓜组);Ⅲ组:Bay K8644预处理组(Bay K8644组);Ⅳ组:缺血预处理组(IP组)。采用在体肺缺血再灌注损伤模型,对比观察各组肺湿/干重比(W/D)、血清及肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)含量和肺组织光镜下形态学变化、肺组织电镜下超微结构改变以及肺组织中肺泡表面活性物质相关蛋白-A(SP-A)的表达水平。 结果 1.各组肺W/D变化: Sham组、Bay K8644组、IP组的肺W/D明显低于I/R组,Sham组、Bay K8644组、IP组与I/R组差异均有统计学意义(P0.05); BayK8644组与IP组的肺W/D差异无统计学意义(P0.05)。 2.肺组织中SOD活性和MDA、MPO含量的测定: Sham组、Bay K8644组和IP组的肺组织中SOD活性明显高于I/R组,MDA含量明显低于I/R组,MPO含量明显低于I/R组,Sham组、Bay K8644组和IP组与I/R组差异均有统计学意义(P0.05);Bay K8644组和IP组差异无统计学意义(P0.05)。 3.血清中SOD活性和MDA含量的测定: 组内比较:Sham组随观察实验时间延长SOD活性轻度下调,MDA含量轻度上升,均无统计学意义(P0.05);I/R组、Bay K8644组和IP组随再灌注时间延长SOD活性明显降低,MDA含量明显上升,均较缺血前差异显著(P0.05)。 组间比较:缺血前Bay K8644组SOD活性较Sham组及I/R组有轻度下降,而MDA含量有轻度上升,但无统计学差异(P0.05);与Sham组比较,Bay K8644组、I/R组和IP组随再灌注时间的延长,各相应时间点SOD活力逐渐下降,而各相应时间点MDA含量逐渐上升,均有统计学差异(P0.05);与I/R组比较,Bay K8644组和IP组SOD活力下降程度较低,MDA含量上升程度不高,缺血后各时间点比较有明显差异(P0.05); Bay K8644组血清中SOD活性和MDA含量与IP组各时间点比较无明显差异(P0.05)。 4.肺组织光镜下形态学变化: Sham组:肺间质及肺泡结构完整,无明显受损,未见明显红细胞渗出。I/R组:肺组织呈病理弥漫性改变,肺不张,肺间质增宽水肿,大量炎症细胞浸润,肺泡壁充血水肿、增厚、炎细胞浸润,肺泡腔内大量红细胞渗出,毛细血管充血水肿,血管壁增厚,血管内大量炎性细胞浸润,渗出严重,肺组织损伤明显。IP组、Bay K8644组:两组基本病理表现相似,肺间质水肿程度较轻,炎症细胞浸润较少,肺泡内红细胞渗出不明显,肺泡结构基本完整,损伤较I/R组明显减轻。 5.肺组织电镜下超微结构变化: Sham组:肺泡结构基本正常。Ⅱ型肺泡上皮细胞结构完整,核膜连接紧密,线粒体内质网等细胞器未见异常,微绒毛多且密。部分肺泡毛细血管充血,淤血,毛细血管内皮细胞未见明显异常。I/R组:肺泡隔明显增厚、水肿。Ⅱ型肺泡上皮细胞微绒毛缺失,板层小体大量排空,上皮颗粒全脱失,胶原纤维生成,线粒体等细胞器大量空泡化,细胞核固缩并成凋亡样改变。肺毛细血管内皮细胞肿胀,基底膜增厚,毛细血管淤血,充血,闭锁,狭窄,炎性细胞浸润,间质大量增多。IP组、Bay K8644组:肺泡隔结构轻度增厚,Ⅰ型上皮细胞内仅个别线粒体水肿。Ⅱ型肺泡上皮细胞表面有微绒毛,但稀少,板层小体存在,上皮部分脱颗粒,部分线粒体空泡化。毛细血管腔内炎性细胞滞留,淤血、充血较轻,偶见肺组织炎性细胞浸润,间质轻微水肿。 6.免疫组织化学方法检测SP-A表达水平: SP-A免疫组织化学阳性染色呈棕黄色。Sham组、IP组、BayK8644组兔肺SP-A主要以膜状形式连续分布于肺泡腔表面,部分肺泡上皮细胞浆内也可见到棕色颗粒,Sham组肺泡基本完整,BayK8644组、IP组肺泡融合较轻。I/R组肺泡腔内很少见到膜状显色,多以颗粒状染色聚集于肺泡腔内或沉积于肺泡表面,肺泡融合严重。Sham组、IP组、Bay K8644组SP-A表达均强于I/R组,有统计学差异(P0.05)。Bay K8644组与IP组无明显统计学差异(P0.05)。 结论 对于预处理时期有针对性地使用钙通道激动剂Bay K8644增加钙离子内流,对在体兔肺缺血再灌注损伤有一定的保护作用,可模拟IP的肺保护作用。


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