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大蒜素对脂多糖诱导人牙周膜成纤维细胞凋亡及IL-1β、TNF-α分泌的影响

罗小良  
【摘要】: 目的探讨大蒜素对脂多糖(LPS)诱导人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)凋亡及分泌IL-1β, TNF-α的影响。 方法在组织贴壁法体外成功培养hPDLCs的基础上 1.利用MTT法检测大蒜素和LPS对hPDLCs的抑制作用;采用AO/EB染色技术观察大蒜素对LPS诱导hPDLCs凋亡的形态学改变;流式细胞术对凋亡细胞进行定量分析。 2. ELISA技术检测大蒜素对LPS诱导hPDLCs分泌IL-1β、TNF-α的影响。 结果 1.当LPS浓度为1μg/ml至100μg/ml时,随着浓度的增长其抑制作用增大(P0.05)。大蒜素的各作用浓度均对hPDLCs有抑制作用,随着大蒜素浓度的不断增大其抑制作用增强(P0.05)。 2. AO/EB染色观察正常对照组中细胞形态正常,胞核及胞浆呈绿色;1μg/ml LPS组细胞核呈绿色,细胞质为绿色略带红色,偶有细胞体积变圆,发出橘红色荧光;LPS与3μg/ml大蒜素共同作用时多数细胞呈绿色;LPS与6μg/ml大蒜素共同作用时多数细胞核呈绿色荧光,细胞质为绿色略带红色;LPS与9μg/ml大蒜素共同作用时多数细胞变圆,发出橘红色荧光。 3.流式细胞定量分析显示:与对照组相比,各大蒜素组细胞早期凋亡率和总凋亡率明显增加(P0.05)。LPS组与对照组比较比较早、晚期及总凋亡率均增加(P0.05)。与LPS单独作用hPDLCs比较,LPS与3μg/ml大蒜素共同作用时总凋亡率降低(P0.05); LPS与6μg/ml大蒜素共同作用时各凋亡率降低(P 0.05); LPS与9μg/ml大蒜素共同作用时晚期凋亡率和总凋亡率升高(P0.05)。 4. ELISA结果显示:各个实验组与对照组比较,IL-1β与TNF-α分泌量明显升高(P 0.05)。LPS与大蒜素共同作用与LPS单独作用比较,IL-1β与TNF-α分泌量降低(P0.05)。 结论 1.大蒜素和/或LPS作用于hPDLCs后,其细胞凋亡率升高。 2.低浓度大蒜素能抑制LPS诱导的hPDLCs凋亡,高浓度的大蒜素促进LPS诱导hPDLCs凋亡。 3.大蒜素能抑制LPS诱导的hPDLCs IL-1β的分泌。 4.大蒜素能抑制LPS诱导的hPDLCs TNF-α的分泌。


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