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木瓜中化学成分分析分离及抗氧化性研究

朱学娟  
【摘要】: 本文研究了中药木瓜中黄酮类化合物的提取、纯化与测定方法,并对木瓜中黄酮及芦丁清除1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)的能力进行了初步探讨,最后采用ICP-MS同时测定了木瓜中的26种微量元素。 (1)总黄酮的提取:以总黄酮的得率为检测指标,分别采用了超声提取法和微波提取法进行提取。通过单因素实验以及正交实验,确定了两种提取方法的最佳提取工艺,超声提取法效果较好,总黄酮得率达10.54%。 (2)总黄酮的纯化:比较了五种大孔树脂的吸附、解吸性能,选择S-8型大孔树脂纯化水木瓜总黄酮,采用浓度为1.50mg/mL木瓜提取液以1BV/h流速上柱,60%乙醇1BV/h流速进行洗脱,所得总黄酮粗品纯度达88.23%。 (3)芦丁的测定及分离:采用聚酰胺柱层析和高速逆流色谱(HSCCC)两种方法对木瓜中芦丁进行分离纯化。确定了最佳分离条件,其中高速逆流色谱法效果较好,芦丁的纯度可达97%。 (4)总黄酮和芦丁的测定:总黄酮的测定,采用用分光光度法,以芦丁为对照品,芦丁浓度C(μg/mL)与吸光度A的回归方程:A=0.0096C+0.0094 (R=0.9991),芦丁浓度在8-64-tg/mL的范围内线性关系良好,加标回收率为96.3-/-103.8%。芦丁的测定,采用高效液相色谱法,色谱条件为:Lichrospher C18柱(150mm×4.6mm; 5μm),所用流动相为流动相为乙腈-0.3%醋酸,检测波长360nm,流速为0.8mL/min,柱温25℃,得芦丁浓度C与峰面积Y的回归方程:Y=7.7×102+7.0×103×C (r=0.9995),线性范围25~125μg/mL。 (5)木瓜提取物和芦丁抗氧化性实验:不同溶剂提取物均具有一定程度清除DPPH自由基的能力,但清除能力差异较大,其强弱顺序为甲醇乙醇乙酸乙酯水氯仿;并证实了芦丁具有一定的抗氧化能力。 (6)微量元素含量的测定:建立电感耦合等离子体原子质谱法(ICP-MS)同时测定了木瓜中26种元素含量的方法。对所测定元素的相对标准偏差(RSD)均小于2%,回收率在96.5%~105.6%之间,结果可信度高。


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