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红花檵木叶片离体培养与植株再生研究

史爱琴  
【摘要】:本研究选择了红花檵木的四个代表性品种‘长叶玫红’、‘花叶2号’、‘嫩叶红’、‘大叶红’组培苗叶片为材料,在不同激素组合、不同光质条件下和不同蔗糖浓度等处理,进行叶片脱分化诱导、愈伤组织再分化、再生苗生根培养及红花檵木‘嫩叶红’(Ⅲ)叶片离体培养过程中花青素和相关生理生化指标变化的研究,选择适宜红花檵木叶片离体再生的培养条件,分析再生过程中相关生理变化,初步建立了红花檵木叶片离体再生植株体系。1.红花檵木叶片离体培养与植株再生(1)适宜叶片愈伤组织诱导的培养基为:MS+NAA1.0 mg/L2.0+6-BA0.5 mg/L,获得的愈伤组织松紧适度,能作为愈伤组织再分化的材料。叶片在四种光质条件下的诱导率高低及时间形成愈伤组织时间的早晚依次为红光、白光、黑暗、蓝光。愈伤组织诱导的培养基中添加30g/L的蔗糖较好。(2)适于‘长叶玫红’愈伤组织再分化的激素组合为:TDZ 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.8 mg/L,40d时获得不定芽;适合‘花叶二号’及‘嫩叶红’愈伤组织再分化的组合为:TDZ 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L,嫩叶红不定芽发生需要45d而‘花叶二号’至少需要60d;适合‘大叶红’愈伤组织再分化的激素组合为:TDZ 1.0 mg/L +6-BA1.0 mg/L+IBA0.5 mg/L,45d时获得不定芽。(3)四种光质中在白光下培养的愈伤组织的分化率最高,愈伤组织分化出芽所需时间的长短依次为蓝光(72d),红光(53d),白光(45d),愈伤组织再分化的培养基中附加40g/L的蔗糖最好。2.红花檵木叶片离体再生过程中生理生化指标的变化(1)由NAA诱导获得的愈伤组织内花青素含量低于picloram及2,4-D,培养基中6-BA浓度的升高叶片的愈伤组织内花青素含量降低,蓝光下培养促进愈伤组织内花青素的合成,培养基中蔗糖含量的增多愈伤组织中花青素的含量上升。(2)由NAA诱导获得的愈伤组织内可溶性糖含量较低,可溶性蛋白含量、POD、SOD活性都高于picloram和2,4-D诱导获得的愈伤组织,CAT酶活性在三种愈伤组织中差别不大,证明了由NAA诱导获得的愈伤组织更有利于不定芽的分化。(3)叶片离体再生过程中可溶性糖含量在不定芽形成前达到峰值;可溶性蛋白含量分别在愈伤组织的形成期及不定芽形成时期达到峰值;POD活性在不定芽形成前达到最高;SOD活性有两个峰值,分别在愈伤组织增殖时期和不定芽形成时期;CAT活性从叶片培养开始一直呈下降趋势,直到不定芽出现后其活性才快速升高。可溶性糖及POD不定芽分化率在不定芽分化出芽时呈正相关,可溶性蛋白及SOD与不定芽分化率在不定芽分化出时呈正相关性,CAT活性与不定芽分化率呈负相关。(4)四种光质下各项生理生化指标的变化趋势相似但其含量和活性的峰值及峰值出现的培养时间都不同,与各种光质下叶片离体培养过程中表现的差异一致。


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