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白英(Solanum Lyratum)糖苷甾体生物碱提取、纯化、检测技术与灭螺效果研究

蔡淑娴  
【摘要】:目前,白英的研究主要集中在提取物药理方面,而对其甾体生物碱的研究甚少,对其提取、分离纯化与检测方面的研究国内外未见报道,本研究在这方面作了初步探讨,首次建立了白英甾体生物碱提取、纯化与检测方法,为其进一步的药理研究做基础;并首次对白英甾体生物碱灭螺效果进行了研究,其主要研究效果如下。 1、本研究采用紫外可见分光光度法建立了白英甾体生物碱的测定方法,该法操作简单、专属性强、重现性好、灵敏度高。白英甾体生物碱最佳检测波长为λ=491nm,以α-茄碱为标准品,在0.0394—0.3150mg/ml范围内其浓度与吸光度有良好的线性关系,回归方程为A=0.3012+0.7842C,相关系数为r:0.9960。稳定性、精密度和重现性均理想,其RSD分别为0.47%(n=6)、0.25%(N=5)、1.39%(n=5)。平均回收率分别为98.7%,102.3%,99.4%,RSD分别为1.16%,1.02%,1.09%,n=3。测定了白英地上部分全草和果实甾体生物碱含量,发现在果实中的含量远高于全草中的含量,其果实中的含量为1.255%,全草中的含量为0.0903%。 2、在提取工艺中,首先通过对影响提取效果的各因素进行单独研究,确定了提取条件,即乙醇浓度为90%左右,浸提温度在40℃左右,浸提时间在4~6h之间,固液比在1:10左右。在此基础上进行了正交试验,并对正交结果进行方差分析。综合考虑提取效果与甾体生物碱稳定性,确定了最佳提取工艺条件为乙醇浓度为90%,浸提温度为40℃,浸提时间4 h,固液比1:9。 3、在硅胶分离纯化研究中采用Glajch三角法对溶剂系统进行了组分优化,确定乙醇、乙酸乙酯、浓氨水作为溶剂系统的组成。用正交实验进行了溶剂配比的优化试验,发现乙酸乙酯:乙醇:浓氨水为6:5:0.5时的效果最好,R_f值分别在0.10,0.21,0.31。并对纯化产品进行了紫外吸收光谱测定。 4、采用浸杀法观察了白英各种提取物的灭螺效果。实验表明乙醇提物具有显著的灭螺效果,其大孔树脂富集物、硅胶分离纯化极性段1和极性段2的LC_(50)分别为6.27mg/L,0.75mg/L和2.69mg/L(95%可行区间分别为6.09~6.45mg/L,0.48~1.02mg/L和2.45~2.93mg/L)。


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