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荷叶黄酮类化合物的分离鉴定及药理作用研究

田娜  
【摘要】:人类“健康”是当今世界研究的主题之一,而肥胖病已成为全球首要的健康障碍。随着人们对化学减肥药物认识的不断加深,天然减肥药物越来越受到中外科研学者所关注。荷叶是睡莲属植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn)的叶片,在全世界有着广泛的分布,是一种既是食品又是药品的天然植物原料,含有多种药理活性物质。多年的临床经验表明:荷叶具有很强的降脂、减肥功能,其功效因子主要是黄酮类物质。目前对荷叶黄酮类化合物的组分、结构鉴定和检测方法方面的研究很少,荷叶降脂减肥的功效因子也还不十分清楚。本论文旨在进一步探明荷叶黄酮类化合物的组分,并寻找荷叶降脂减肥的功效因子。其研究结果为系统、合理、全面的开发和利用荷叶黄酮类化合物提供了科学依据,对于全面开发、综合利用这一独特的天然植物资源具有非常重要的理论意义和实际应用价值。实验研究结果归纳如下: (1) 黄酮类化合物的分离鉴定 采用D-101树脂和聚酰胺层析法、半制备液相色谱对荷叶的乙醇-水提取物进行分离纯化,从中得到4个化合物,通过UV、IR、MS、NMR(包括~1H-NMR、~(13)C-NMR、DEPT、二维)等光谱解析,鉴定为:金丝桃苷(Hyperons,Ⅰ)、异槲皮苷(Isoquercetin,Ⅱ)、紫云英苷(Astragalin,Ⅲ)、槲皮素(Quercetin,Ⅳ),其中紫云英苷为首次从荷叶中分离获得。 (2) 主要化学成分的研究 采用HPLC-MS测得荷叶黄酮粗提物中含有13种主要的化合物,并测得其分子量,依次为507、610、578、520、494、478、596、464、464、448、448、478、302道尔顿。其中第8、9、11和13号物质为该研究分离得到的化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。色谱条件:美国沃特斯Kromasil C_(18)柱(250mm*4.6mm);流动相:水-乙睛;用前经0.45μm微孔滤膜抽滤,超声脱气;流速为1.0ml/min;进样量为20μl;柱温30℃;检测波长360nm;梯度洗脱。 (3) 黄酮类物质降脂减肥作用的研究 采用体外酶抑制法测定荷叶黄酮类物质对淀粉酶、脂肪酶活性的抑制作用,结果表明:荷叶黄酮粗提物对脂肪酶、淀粉酶活性的抑制率随浓度的增大而增强,当浓度大于0.7mg/ml后抑制率的增强变缓,组分A和化合物I(金丝桃苷,Hyperons)对脂肪酶、淀粉酶活性的抑制作用均不如荷叶黄酮粗提物的强,这说明荷叶具有降脂减肥功能可能并非是单一的化合物在起作用,而是物质间的协同作用。


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