收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

致病杆菌CB43菌株抑菌作用及抗菌物质的分离与纯化

肖罗  
【摘要】:致病杆菌CB43菌株(Xenorhabdus sp.)是中国农业科学院环境与可持续发展研究所从采自我国东北地区的昆虫病原线虫新种—拟双角斯氏线虫(Steinernema ceratophorum)肠道内分离的菌株,属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae)致病杆菌属(Xenorhabdus Thomas and Poinar)。生理生化特性以及16srRNA分析发现,该菌株与致病杆菌属其它已描述的种存在较大差异,可能为一新种。该菌株对多种植物病原真菌尤其是番茄灰霉病菌具有较强的抑制活性,研究该菌的抑菌作用机理,分离纯化其抗菌活性成份,对研制拥有自主知识产权的新型生物农药具有重要指导意义。 本文研究了CB43菌株代谢物对番茄灰霉病菌的抑制作用及抑菌作用机理,测定了CB43菌株抗菌代谢产物的理化性质,利用大孔吸附树脂和离子交换层析技术进行了抗菌物质的分离与纯化,主要结果如下: 1.筛选出对番茄灰霉病菌具有强烈抑制作用的CB43菌株。CB43菌株代谢产物对灰葡萄孢菌丝生长有较强的抑制作用,125mL/L发酵液就能完全抑制菌丝的生长,并具有杀死作用。62.5 mL/L的发酵液72h后菌丝抑制率仍达83.35%。 2.研究了CB43菌株代谢物的抗菌作用机理。20mL/L的发酵液处理灰葡萄孢菌丝悬浮液,能引起菌丝畸形,异常分支、粗短,甚至原生质外渗。CB43发酵液对灰葡萄孢菌分生孢子有杀死和抑制萌发作用,500~62.5 mL/L的发酵液处理16h后,孢子萌发抑制率达88.1%~97.91%。 3.确定了以枯草芽孢杆菌代替番茄灰霉病菌作为抗菌物质分离提取过程中的指示菌。 4.测定了CB43菌株抗菌代谢产物在不同pH及温度组合下的稳定性,明确了抗菌物质在25℃、80℃和-20℃条件下,2h-48h范围内,pH为2~12之间,抑菌活性没有显著降低。说明发酵液在不同pH和不同温度下均比较稳定。 5.测定了抗菌物质的极性和带电荷性。纸层析和纸电泳结果表明发酵液中主要抗菌物质为水溶性、极性比较强的两性物质。 6.筛选出对抗菌物质吸附效率较高的大孔吸附树脂H103,对抗菌物质的吸附率达90%以上;确定了最佳上样流速为5mL/min,最佳洗脱溶剂为40%的乙醇溶液内加0.01mol/L的HC1。 7.筛选出适合纯化抗菌物质的110弱酸树脂;确定了适合纯化的分步洗脱技术和方法,用0.2mol/L~1.8mol/L NH_4CL梯度洗脱能将抗菌物质分成3个主要组分。通过紫外检测,3个主要组分的最大吸收值分别在280m,216nm和190nm~200nm的末端吸收。用HPLC固定波长检测,3个主要组分均已经初步得到纯化。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 孔建,王文夕,赵白鸽,程红梅,申效试,张桂芬;枯草芽孢杆菌B-903菌株抗真菌作用研究初报[J];中国生物防治;1992年02期
2 黄奔立;朱华;沙爱红;;水稻白叶枯病菌抗菌物质产生的研究[J];中国生物防治;1996年02期
3 谷祖敏;王英姿;纪明山;程根武;;拮抗细菌B9菌株抗菌物质的初步研究[J];天然产物研究与开发;2006年04期
4 裴韬;任大明;石皎;;小麦赤霉病拮抗菌P72抗菌物质的分离纯化和性质研究(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2008年06期
5 王文夕,孔建,赵白鸽,程红梅,申效诚,张桂芬;枯草芽孢杆菌B—903抗菌物质产生条件及部分特性的研究[J];华北农学报;1994年02期
6 蓝江林,吴珍泉;美洲大蠊抗菌物质的诱导与提取[J];福建农林大学学报(自然科学版);2004年01期
7 任争光;张志勇;李丹;陈冉;魏艳敏;;芽孢杆菌BJ-6产抗菌物质发酵条件初探[J];中国农学通报;2007年05期
8 杨倩;于宏伟;郭润芳;贾英民;;侧孢短芽孢杆菌S62-9产抗菌物质的分离纯化及部分特性的研究[J];河北农业大学学报;2010年02期
9 王远程;刘伟;杨峰;冯国蕾;;家蝇血淋巴的提取及抗菌物质的诱导[J];微生物学报;1992年06期
10 李婷;赵立苹;张谨华;黄登宇;;中华稻蝗抗菌物质的诱导及所在部位的确定[J];山西大学学报(自然科学版);2007年04期
11 屈贤铭;;昆虫免疫和抗菌物质的研究及其应用的可能性[J];蚕桑通报;1985年02期
12 张学君,刘焕利,潘小玫,彭广茜,王金生;小麦纹枯病生防菌株B_3产生抗菌物质条件的研究[J];南京农业大学学报;1995年01期
13 朱祥瑞,陈玉银,潘佩飞,郑源庞,李端阳;蚕卵抗菌物质的诱导及其蚁蚕的动物试验[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);1999年02期
14 别小妹;陆兆新;吕凤霞;赵海珍;杨胜远;孙力军;;Bacillus subtilis fmbR抗菌物质的分离和鉴定[J];中国农业科学;2006年11期
15 易灿;蒋立文;;纳豆菌代谢产物抗菌作用的研究现状与展望[J];农产品加工;2008年05期
16 钱华,吴蓉,左小明,赵小立;马尾松毛虫幼虫血淋巴羧酸酯酶的诱导及其与抗菌物质的相关性研究[J];浙江林业科技;1998年06期
17 沈尔安;;苍蝇与人类健康[J];农家科技;2006年01期
18 刘雪;穆常青;蒋细良;郭萍;田云龙;朱昌雄;;枯草芽孢杆菌代谢物质的研究进展及其在植病生防中的应用[J];中国生物防治;2006年S1期
19 任争光;刘媛;刘素花;陈勇;张志勇;魏艳敏;;芽孢杆菌BJ-6的抗菌物质及其抑菌作用[J];北京农学院学报;2006年03期
20 赵瑞;江木兰;胡小加;姚小飞;;培养条件对枯草芽胞杆菌TU100生长和产生抗菌物质的影响[J];中国油料作物学报;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 肖罗;杨秀芬;邱德文;戴良英;杨怀文;刘峥;袁京京;;致病杆菌CB43菌株对灰霉病菌的抑制作用[A];第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会论文集[C];2006年
2 王小平;徐冠军;;黄粉虫幼虫血淋巴中抗菌物质的初步分离[A];走向21世纪的中国昆虫学——中国昆虫学会2000年学术年会论文集[C];2000年
3 张淑梅;王玉霞;孟利强;李晶;赵晓宇;王傲雪;李景富;;内生解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌物质研究[A];第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会会议论文摘要集[C];2011年
4 叶云峰;黎起秦;袁高庆;林纬;缪剑华;;内生枯草芽孢杆菌B47菌株胞外抗菌物质的初步研究[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
5 杨良;史应武;娄恺;;新疆甜瓜细菌性斑点病拮抗放线菌抗菌物质的初步研究[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
6 何红;蔡学清;关雄;胡方平;;辣椒内生枯草芽孢杆菌BS-2菌株的抗菌物质及其性质研究[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
7 许兵红;艾予川;史明珠;曾利萍;李进芬;;丝光绿蝇抗菌物质诱导研究[A];中国动物学会全国第九次寄生虫学学术讨论会论文摘要集[C];2003年
8 王瑞霞;王振中;;水杨酸诱导水稻抗病效果及小分子抗菌物质的研究[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
9 童蕴慧;唐丽娟;徐敬友;纪兆林;陈夕军;;地衣芽孢杆菌W10对灰葡萄孢的作用机理及其抗菌物质[A];第三届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第二届全国生物农药研讨会论文集[C];2004年
10 杜春梅;平文祥;王葳;;菌株BL-1发酵液中抗菌物质的分离提纯[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 马艳;辣椒疫病生防菌Penicillium striatisporum Pst10的筛选、抗菌物质分离纯化及分子标记[D];南京农业大学;2008年
2 乌云达来;广谱抗菌活性Lactobacillus acidophilus NX2-6的分离筛选及其抗菌物质的研究[D];南京农业大学;2009年
3 张琇;海洋芽孢杆菌S-12-86溶菌酶的发酵、纯化与生物活性的研究[D];中国海洋大学;2007年
4 林玲;内生芽孢杆菌及抗菌物质的鉴定和对作物黄萎病的防治效果[D];南京农业大学;2009年
5 方敦煌;防治烟草赤星病根际芽孢杆菌的筛选及其抗菌物质研究[D];福建农林大学;2007年
6 王芳;苦参内生拮抗细菌筛选及其抗菌物质纯化鉴定[D];沈阳农业大学;2009年
7 江木兰;油菜内生枯草芽孢杆菌BY-2的定殖生态、抗菌机制和防治菌核病的研究[D];华中农业大学;2007年
8 刘姝;海洋链霉菌GB-2的分离筛选及其抗菌物质的研究[D];南京农业大学;2007年
9 孙力军;植物内生菌Bacillus amyloliquefaciens ES-2的分离筛选及其抗菌物质的研究[D];南京农业大学;2006年
10 张巍;纳米抑菌与抗菌内植物的研发[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 肖罗;致病杆菌CB43菌株抑菌作用及抗菌物质的分离与纯化[D];湖南农业大学;2005年
2 李永才;苹果梨(Pyrus bretchneideri Rehd.)黑斑病潜伏侵染及其预先合成抗菌物质的变化和诱导[D];甘肃农业大学;2000年
3 李婷;中华稻蝗(Qxya chinensis)抗菌物质的分离及其部分性质[D];山西大学;2007年
4 姚岚;一株水稻纹枯病拮抗细菌及其抗菌物质的研究[D];浙江大学;2011年
5 贾广韬;多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)Cp-S316抗菌物质的提取、体外抑菌试验及毒性研究[D];山东农业大学;2005年
6 王葳;几株产抗菌物质芽孢杆菌的鉴定及其抗菌物质的初步分离[D];黑龙江大学;2006年
7 关小红;枯草芽孢杆菌Tpb55抗菌物质纯化及特性的初步研究[D];中国农业科学院;2008年
8 赵凯;番茄青枯病拮抗菌抗菌物质的研究[D];西南大学;2006年
9 桂林;海洋微生物的拮抗菌筛选及一株抗酵母放线菌YT研究[D];安徽农业大学;2007年
10 索相敏;三种昆虫抗菌物质的诱导及抑菌活性研究[D];河北农业大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 上官继东;大豆低聚糖如何产生抗菌物质[N];中国食品质量报;2003年
2 廖志林;新型抗肿瘤物质可直达瘤体深处[N];健康报;2007年
3 来德辉记者 尹晓华;华西教授抗癌论文轰动世界[N];四川日报;2007年
4 杭州立欣生物技术有限公司 王欣博士;绿源素[N];中国畜牧报;2003年
5 高茜;人体中的“奇妙良方”[N];上海中医药报;2007年
6 ;绿源素——绿色养殖的基本“元素”[N];中国畜牧报;2003年
7 邱星辉 何凤琴 李梅;发掘动物蛋白新“大陆”[N];中国畜牧兽医报;2005年
8 潘亮;到海洋找新药[N];福建科技报;2003年
9 盛国华;生鲜食品需要适宜的“活性”环境[N];中国包装报;2006年
10 范春生 葛素表;研究发现:苍蝇可提取抗菌素[N];中国中医药报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978