收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

籼稻成熟胚再生体系的建立及反义waxy基因转化籼稻的研究

吴顺  
【摘要】:水稻是我国的主要粮食作物之一,其播种面积占全部粮食作物面积的30%,产量则占粮食总产量的40%。由于粮食的不断增产和人民生活水平的提高,人们对稻米的要求逐步从量的需要转向质的要求,米饭的食味品质备受关注。湖南作为我国稻米的主要产区之一,绝大部分水稻品种的直链淀粉含量偏高,品质较差,严重影响了稻米的出口,因此,尽快改良我省稻米的直链淀粉含量已成为一项极其重要且十分紧迫的任务。运用基因工程手段培育转基因水稻为传统水稻育种和遗传改良开辟了新的途径。本研究以3个籼稻品种的成熟胚为材料,建立了适合于籼稻愈伤组织的诱导和再生体系。通过对水稻愈伤组织培养过程中的生理生化特性进行的研究,优化了农杆菌遗传转化条件,并将外源蜡质反义片段和抗潮霉素抗性基因共转化湘早籼33号和01早5202愈伤组织,经过抗性筛选和植株再生,得到了既含目的基因又含标记基因的共转化植株。研究结果如下: 1.籼稻成熟胚愈伤组织的诱导和再生体系的建立。三种水稻组织培养中常用的基本培养基(MS、N_6、CC)对愈伤组织诱导率影响不大,但以N_6培养基上生长的愈伤组织质量较好,而CC培养上培养的愈伤组织分化率较高。在实验中,选择以N_6培养基作为籼稻愈伤组织诱导的基本培养基,而以CC培养基作为愈伤组织分化的基本培养基。2,4-D是植物组织培养中最常用的愈伤组织诱导剂,但其浓度过高或过低都不利于水稻愈伤组织的诱导,在N_6基本培养基上添加1.5~2mg·L~(-1)的2,4-D能有效地诱导供试材料成熟胚愈伤组织的形成。适当浓度的6-BA(0.2~0.4mg·L~(-1))能改善愈伤组织的质量,提高其植株再生频率,但过高浓度的6-BA会对愈伤组织产生毒害作用。 2.细胞生长、分化和形态建成的方向取决于其生理和生化的变化。籼稻愈伤组织在继代培养过程中,可溶性蛋白含量呈现有规律的变化。在愈伤组织旺盛生长过程中,其可溶性蛋白含量明显提高,可溶性蛋白组分电泳条带增多。愈伤组织在转入分化培养基后,蛋白合成明显增加,可溶性蛋白含量分别在分化培养的第6d和第12d出现峰值,而此时正是愈伤组织形态发生明显变化的时期。这表明,蛋白质的活跃合成为器官的形态建成奠定了物质基础。愈伤组织培养过程中某些保护酶活性及其同工酶的变化反映了其细胞内自由基代谢的规律。PPO活性高低与愈伤组织褐化程度有关。POD和SOD活性的高低反映了细胞内代谢的旺盛


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 马杰;郭利勇;崔波;张仙云;;金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探[J];安徽农业科学;2008年06期
2 包英华;白音;王羽梅;黄燕瑛;许喜佳;徐倩雯;;豇豆再生体系的建立[J];广东农业科学;2006年04期
3 陈超;侯喜林;王桂兰;陈玉斌;;红掌再生团块和不同愈伤组织衰老指标的比较研究[J];西北植物学报;2010年08期
4 牛亚玲;王丕武;曲静;高雯雯;王俊玲;王薇;兰磊;;优良玉米自交系丹598和丹988幼胚愈伤组织的诱导和再生[J];分子植物育种;2009年04期
5 陈敏敏;张卫明;赵金凤;刘起棠;顾龚平;陆长梅;;资源植物罗布麻的愈伤组织诱导和植株再生研究[J];武汉植物学研究;2010年03期
6 丁路明,龙瑞军,王长庭;肯塔基草地早熟禾愈伤组织的诱导及再生体系的建立[J];中国草地;2005年03期
7 欧元;袁晓凡;赵兵;王晓东;陈书安;王玉春;;天山雪莲RAPD反应条件的优化及再生体系DNA多态性分析[J];中国现代中药;2009年02期
8 张先云;袁秀云;马杰;秦喜庆;;樱桃再生体系研究[J];中国农学通报;2010年07期
9 潘刚;楼程富;;桑树遗传转化及受体再生研究进展[J];蚕桑通报;2007年02期
10 张彦妮;卓丽环;;复叶槭顶芽组织培养再生体系的建立[J];植物生理学通讯;2007年04期
11 郭辉;;丁香属植物组织培养的研究进展[J];青海师范大学学报(自然科学版);2009年02期
12 张先云;;国槐离体培养及高效再生体系的优化[J];中国农学通报;2010年11期
13 梁雪连;陈平;黄黉;佘伟标;姚冬梅;张庚;;草坪草转基因研究进展[J];种子;2006年09期
14 李冰华;金晓玲;刘雪梅;;香水百合鳞片组织培养再生体系的建立[J];江苏农业科学;2008年04期
15 陈君梅;张显;;唐菖蒲花序再生体系的建立[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2009年04期
16 吴兴海;邵秀玲;郑媛;牛佩;邓明俊;;甜椒的离体培养及建立再生体系研究[J];亚热带植物科学;2006年02期
17 刘军,赵兰勇,丰震,张美蓉,韩进,杨传强;菊花叶片离体高效再生体系的建立[J];山东农业大学学报(自然科学版);2004年02期
18 易自力,陈智勇,蒋建雄,周朴华;三种冷季型草坪草愈伤组织再生体系的建立[J];中南林学院学报;2005年01期
19 赵佐敏;非洲菊花托离体再生体系的建立[J];种子;2005年09期
20 郭素娟;任鹏;王桂云;;燕山红栗下胚轴再生体系的建立[J];西南林学院学报;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李霞;阎丽娜;王满;;不同籼稻品种成熟胚诱导过程愈伤组织超微结构的比较[A];中国植物学会植物细胞生物学2010年学术年会论文摘要汇编[C];2010年
2 朱向涛;王雁;彭镇华;律春燕;;牡丹幼嫩花瓣愈伤组织诱导及芽的分化[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
3 傅经国;吴鸣建;何娟;尚玉俊;赵天增;宋立新;;RP-HPLC法测定苦皮藤愈伤组织中苦皮素A的含量[A];中国制药工业药理学会20周年学术会议论文集[C];2002年
4 曾小美;王凌健;夏镇澳;沈允钢;;烟草光自养型愈伤组织的光合特性研究[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
5 翟晓巧;;二乔刺槐愈伤组织超低温保存研究[A];第六届全国林木遗传育种大会论文集[C];2008年
6 朱向涛;王雁;彭镇华;律春燕;郑宝强;;牡丹愈伤组织扫描电镜观察[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
7 孙震晓;刘传召;郭善利;马清温;;植物愈伤组织超低温保存的实验研究[A];第七届全国系统与进化植物学青年学术研讨会论文摘要集[C];2002年
8 周安莲;余茂德;;桑子叶愈伤组织的诱导培养[A];中国蚕学会第三届青年学术研讨会暨浙江省第二届青年学术论坛——蚕桑分论坛论文集(上册)[C];2001年
9 许鸿源;蒙爱东;李春霞;邓锡青;杨美纯;周歧伟;黄春燕;许鸿章;;灵发素(LFS)对三七愈伤组织发生和增殖的影响[A];2003年广西植物生理学年会论文汇编[C];2003年
10 佘建明;张保龙;陈志一;倪万潮;;草坪型高羊茅成熟种子离体培养植株再生技术研究[A];全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吴顺;籼稻成熟胚再生体系的建立及反义waxy基因转化籼稻的研究[D];湖南农业大学;2005年
2 伍碧华;小麦离体培养的营养器官与花器官发育研究[D];四川农业大学;2003年
3 钟原;紫斑牡丹分生结节的诱导与培养[D];北京林业大学;2011年
4 宋建英;邓恩桉微体快繁技术和耐寒性的研究[D];南京林业大学;2008年
5 何铁剑;菠萝组织与细胞培养及其诱导产酶研究[D];华南理工大学;1994年
6 朱向涛;凤丹体胚发生及愈伤组织诱导芽分化研究[D];中国林业科学研究院;2010年
7 陈超;红掌愈伤组织和再生团块的发育及四倍体诱导[D];南京农业大学;2011年
8 秦磊;牡丹分生结节诱导、发生与发育及细胞组织学观察[D];北京林业大学;2012年
9 姚娜;竹子组织培养与毛竹愈伤组织分化中基因表达分析[D];中国林业科学研究院;2010年
10 耿小丽;苜蓿单倍体、纯合四倍体的诱导及愈伤组织DNA含量变异的研究[D];甘肃农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙碧坡;抗盐草地早熟禾高效转基因体系的研究[D];中国农业大学;2005年
2 卢毕生;石斛兰高效再生体系的建立与抗冻蛋白(AFP)基因转化的研究[D];华南热带农业大学;2005年
3 张清梅;中小型苹果再生体系的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
4 吴涛;金丝慈竹(Bambusa emeiensis ‘viridiflavus’)愈伤组织培养及植株再生的研究[D];南京林业大学;2008年
5 郑玉梅;月季再生体系与pBinETR1转化初探[D];中国农业大学;2004年
6 宋仪农;秋根秋海棠“金正日花”组织培养再生体系的研究[D];山东农业大学;2007年
7 史秀玲;盐角草体外再生体系(Salicornia europaea L.)及floral-dip转化系统的建立[D];中国科学院研究生院(植物研究所);2006年
8 肖晓蓬;多花野牡丹离体培养与再生体系的建立[D];福建农林大学;2008年
9 卢爱华;丽格海棠离体再生过程中酶活性及激素含量的变化[D];暨南大学;2009年
10 周杰;籼稻成熟胚愈伤组织诱导及再生体系的优化[D];中南民族大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;俄罗斯培育出更耐涝小麦[N];新华每日电讯;2010年
2 肖清;完善城市资源再生体系青岛循环经济发展再发力[N];中国高新技术产业导报;2006年
3 唐山市丰南区林业局 汪林华 魏文娟 贾久正;这是杨树破腹病[N];河北科技报;2006年
4 本报记者  黄秦平;废纸回收再生体系亟待完善[N];消费日报;2006年
5 水清;苏中麦茬直播慎用中籼稻品种[N];江苏农业科技报;2007年
6 濮阳市世锦现代农业发展有限公司 张晖 王绪月;花卉无性系的快速繁殖[N];中国花卉报;2006年
7 容城县农牧局 赵会芳 容城县八于乡农技服务站 沈山林;大棚西瓜嫁接育苗十注意[N];河北科技报;2007年
8 曹涤环 刘建武;影响苗木嫁接成活的因素[N];中国绿色时报;2008年
9 山东 吴建民 田俊华;硫磺在花木栽培上的妙用[N];中国花卉报;2005年
10 河南省三门峡市园林科学研究所 许冬丽 高秀云 李艳杰;春植树木夏亡原因及防范[N];中国花卉报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978