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刺葡萄(Vitis davidii Fo(?)x)原生质体培养及体细胞融合技术体系的研究

吕长平  
【摘要】:刺葡萄Vitis davidii(Roman.)Fo(?)x.为葡萄科葡萄属东亚种群的一种种质资源,分布于陕西、甘肃南部、云贵高原和长江流域,常生长在1500m以下的谷地、沟边或林缘。植株强健,枝粗叶大,枝上密布直立或稍弯皮刺;穗长(20cm以上),果大(15mm以上),晚熟,果皮较厚,风味稍淡,产量高,病虫害少,对白腐病、炭疽病和黑痘病抗性较强,但对霜霉病抗性较差。有少量鲜食栽培,江西省从刺葡萄中选育出了“塘尾”、湖南农业大学选育出“紫秋”等优良栽培品种。刺葡萄极耐阴湿,扦插不易成活,多以华东葡萄为砧木嫁接繁殖,是抗湿热和抗病育种的重要种质资源。本文以刺葡萄为试材,对其愈伤组织的诱导、离体培养、原生质体分离、原生质体培养、原生质体再生植株进行了研究;以刺葡萄和玫瑰香为试材,对葡萄原生质体电融合技术体系进行了比较系统的研究,旨在运用生物技术为刺葡萄的快速繁殖、抗性育种等方面的科学研究提供理论依据和操作技术。研究结果如下: 1.刺葡萄愈伤组织的诱导和离体培养研究 本研究以刺葡萄的叶片、卷须、茎段、幼果、果柄为试材,以1/2MS和B_5为基本培养基,通过不同浓度的生长TI调节剂配比,探讨了刺葡萄愈伤组织的诱导率及继代培养情况;以刺葡萄愈伤组织为材料,在B_5培养基上附加不同的生长TI调节剂种类及浓度配比,探讨了刺葡萄芽的诱导、增殖和生根。结果表明:1/2MS和B_5都是适合刺葡萄愈伤组织诱导的基本培养基;诱导材料以茎段对剖的诱导率最高,以B_5+2,4-D3mg·L~(-1)+6-BA0.01mg·L~(-1)的效果最好,愈伤组织诱导率可达100%,且愈伤组织的质量高;继代培养以B_5+2,4-D0.5mg·L~(-1)+6-BA0.2mg·L~(-1)为培养基,4周继代一次,愈伤组织的密度适中,生长速度较快,褐变率低,仅为15%。刺葡萄愈伤组织的分化率很低,仅在B_5+ZT 0.5mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1)和B_5+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.02mg·L~(-1)两种培养基上培养有少量胚状体产生,胚状体分化成苗的能力弱,分化率最高为13.3%,增殖培养以B_5+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)培养基为佳,4周可增殖6.4倍;生根培养以B_5+IBA1.0mg·L~(-1)+NAA0.01mg·L~(-1)培养基为好,4周平均生2.1条,根粗达2.4mm。


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