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柴朴汤对哮喘大鼠HIF-1α和TGF-β1的动态表达影响

刘希  
【摘要】:目的:观察HIF-1α和TGF-β1在哮喘大鼠中表达水平的动态变化,分析两者与气道重塑的关系,探讨两者在哮喘气道重塑中的作用,为临床检测气道重塑提供新的思路;探讨柴朴汤治疗哮喘气道重塑的可能作用机制。 方法:将健康SD大鼠70只随机分成3组,即哮喘A组(30只,分为哮喘二周A1组、四周A2组、八周A3组各10只),柴朴汤B组(30只,分为柴朴汤二周B1组、四周B2组、八周B3组各10只),正常对照C组(10只)。A、B组以腹腔注射OVA致敏及反复雾化激发建立大鼠哮喘模型,B组激发前30min以柴朴汤1.5g/kg灌胃,各组分别在末次激发24h内处死大鼠。常规病理切片观察肺组织及气道粘膜中炎性细胞的浸润情况;运用图像分析软件测定Pbm、Wat、Wai、Wam,将Wat、Wai、Wam用Pbm标准化;RT-PCR检测HIF-1α、TGF-β1 mRNA的表达水平;免疫组织化学方法检测HIF-1α、TGF-β1蛋白的表达。 结果: 1、大鼠气道重塑情况 正常对照组大鼠气道平滑肌层均匀,周围无炎症细胞浸润,无杯状细胞增生及黏液分泌;哮喘二周组支气管壁及气道平滑肌增厚,黏膜下水肿,气道黏膜皱襞增多,气道上皮受损、脱落,气道周围支气管黏膜下有大量炎症细胞浸润;哮喘四周组与哮喘二周组相比,气道平滑肌明显增厚,上皮下纤维化明显,基底膜增厚且不规则,管腔内可见粘液栓形成,管腔相对狭窄,Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差异有统计学意义(P0.05);哮喘八周组与哮喘四周组相比,气道平滑肌增厚更明显,上皮下纤维化更明显,大量粘液栓形成,管腔更狭窄,Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差异有统计学意义(P0.05);经柴朴汤干预后,与相同时间段的哮喘二周组、哮喘四周组、哮喘八周组比较,气道重塑情况均较哮喘组轻,Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差异有统计学意义(P0.05);而柴朴汤二周组与正常对照组相比,Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差异无统计学意义(P0.05)。 2、大鼠支气管肺组织HIF-1α、TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平哮喘二周组支气管肺组织中HIF-1α、TGF-β1mRNA和蛋白表达水平已经升高,哮喘四周组HIF-1α、TGF-β1mRNA和蛋白表达水平进一步升高,两者相比,有显著性差异(P0.05);哮喘八周组其表达水平升高更明显,与哮喘四周组相比,有显著性差异(P0.05);经柴朴汤干预后,与相同时间段的哮喘二周组、哮喘四周组、哮喘八周组比较,HIF-1α、TGF-β1mRNA和蛋白表达水平均有下降,有显著性差异(P0.05);与正常对照组相比,柴朴汤二周组仍升高,但差异无显著性(P0.05)。 结论: 1、HIF-1α、TGF-β1在哮喘大鼠气道重塑模型中呈动态变化过程,随着激发次数的增多,表达逐渐增加。 2、柴朴汤治疗可以通过下调HIF-1α、TGF-β1的表达,减轻哮喘大鼠气道重塑。


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