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oxHDL_3对人脐静脉内皮细胞t-PA表达的影响

刘峰涛  
【摘要】:目的: 探讨oxHDL。对人脐静咏内皮细胞株HUVEC 12细胞组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,t PA)表达的影响及其相关机制。 方法: HUVEC 12细胞分别经不同浓度(0、20、40、80、120mg/L)、不同时间(0、6、12、24、48h)HDL。、oxHDL。孵育,采用RT PCR、ELISA和免疫细胞化学的方法检测t PA表达情况。用Western blot免疫印迹方法检测HDL。、oxHDL。对Phospho p38 MAPK~细胞核内NF K Bp65含量的影响。分别用p38 MAPK#~NF K B的特异性抑制剂sB203580和BAYl卜7085来探讨HDL。、oxHDL。影,gHUVEC细胞t PA表达的机制。 结果: 1.与Omg/L oxHDL。组比较,oxHDL。呈剂量和时间依赖性下调t PA mRNA的表达,以80mg/L浓度组5~HoxHDL。24h组减少最明显,较Omg/L oxHDL。组分别下降了30%~J19%(均P(O.05);ELISA结果显示,oxHDL。也呈剂量和时间依赖性减少了细胞培养液中t PA的含量,以80rag/L浓度组5~HoxHDL。作用24h组减少最明显,较Omg/L oxHDL。分别下降了34%和35%(均P(O.05);免疫细胞化学结果显示,与对照组~13HDL。(80mg/L)组相比,oxHDL。(80mg/L)组t PA蛋白的表达有所下降,较对照组下降了40%,而较HDL。(80mg/L)组下降了42%(均P(O.05),与对照组相比,HDL。组t PA表达没有明显变化。 2.与对照组~13HDL。组相比、oxHDL。(40、80mg/L)组Phospho p38 MAPK的水平增加且细胞核内NF K B p65的量也有所增加,与对照组相比,oxHDL。(80mg/L)组Phospho p38 MAPK的水平增加了40%,核内NF K Bp65的量增加了45%(Y(0.05),与HDL。(80mg/L)组相比,oxHDL。(80mg/L)组Phospho p38 MAPK的水平及细胞核内NF K Bp65的量分别增加了22%~31%(均Y(0.05)。 3.采用p38 MAPK抑制剂(SB203580)与NF K B抑制剂(BAYl卜7085)予页先处理后,oxHDL。抑制t PA mRNA及蛋白表达的作用有所下降,与oxHDL。(80mg/L)组相比,t PA mRNi的表达分别增加了11%和13%,而t PA蛋白表达分别增加了9%和11%(均P(0.05)。 结论: 1.oxHDL。呈时间和剂量依赖性地下调脐脐静咏内皮细胞t PA mRNA和蛋白表达: 2.oxHDL。对内皮细胞t F)A表达的作用与p38 MAPK和NF K B信号转导途径相关。


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