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CGRP保护H_2O_2诱导的HUVEC损伤以及对p38MAPK/Nox4通路的影响

徐竞鸥  
【摘要】:目的:用H_2O_2诱导人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells , HUVEC)损伤;观察CGRP对H_2O_2损伤HUVEC的保护作用,以及对p38 MAPK磷酸化和Nox4表达的调节作用;探讨CGRP对H_2O_2损伤HUVEC的保护机制。 方法: MTT检测HUVEC活力;流式细胞术检测HUVEC凋亡率;Western Blot法检测p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK以及Nox4蛋白表达;Real-time PCR检测Nox4 mRNA表达。 结果:H_2O_2能显著降低HUVEC活力,并呈时间浓度依赖性。其中500μM H_2O_2能诱导HUVEC活力下降约50%。H_2O_2诱导HUVEC凋亡,500μM浓度时达到最大。10nM和100nMCGRP均可以增加HUVEC活力,其中100nM CGRP能使H_2O_2诱导的HUVEC的凋亡率显著下降。500μM H_2O_2能诱导p38 MAPK磷酸化并能上调Nox4蛋白和mRNA表达,CGRP能在30min内抑制H_2O_2诱导的p38 MAPK磷酸化以及Nox4的表达。CGRP的作用能被CGRP_(8-37)阻断。CGRP部分通过抑制p38 MAPK下调Nox4表达。 结论: H_2O_2对HUVEC的损伤与诱导p38 MAPK磷酸化,上调Nox4表达有关;CGRP对HUVEC的保护机制可能与抑制p38 MAPK磷酸化和Nox4表达有关。


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