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胞质M-CSF通过PI3K诱导ABCG2的质膜转位介导MCF-7细胞对阿霉素耐药

王阳威  
【摘要】:目的:研究胞质M-CSF引起肿瘤多药耐药的可能机制 方法:常规培养MCF-7-M细胞、MCF-7-C细胞和MCF-7细胞,用Western blot方法检测三种细胞的总ABCG2蛋白和膜蛋白水平;用RT-PCR检测三种细胞ABCG2的转录水平;用免疫荧光检测三种细胞ABCG2亚细胞定位;荧光分光光度法检测三种细胞内药物浓度;MTT检测三种细胞对抗肿瘤药物阿霉素的耐药性。 结果:MCF-7细胞、MCF-7-C细胞、MCF-7-M细胞ABCG2的转录水平和总蛋白水平无明显变化;但MCF-7-M细胞膜ABCG2蛋白水平显著高于MCF-7-C细胞和MCF-7细胞(p0.05)。与MCF-7-C细胞和MCF-7细胞比较,荧光分光光度法检测结果显示阿霉素在MCF-7-M细胞内的浓度降低(p0.05),MTT显示MCF-7-M细胞对阿霉素的敏感性降低, MCF-7-C细胞、MCF-7细胞和MCF-7-M细胞的IC_(50)值分别为7.87±0.43、8.06±0.31、121.47±0.39μg/mL。用PI3K的抑制剂LY294002和ABCG2的特异性抑制剂烟曲霉素C预处理细胞,阿霉素在MCF-7-M细胞内蓄积增加,对阿霉素的敏感性增强(IC_(50)值各自为11.47±1.42和32.79±1.73μg/mL,p=0.007、0.01 0.05);PI3K抑制剂LY294002诱导MCF-7-M细胞膜ABCG2蛋白表达增加。 结论:胞质M-CSF诱导MCF-7细胞对阿霉素耐药。PI3K和ABCG2转运蛋白参与胞质M-CSF诱导MCF-7细胞对阿霉素耐药。胞质M-CSF激活PI3K,导致ABCG2转运蛋白从胞质转位至胞膜,增强ABCG2转运蛋白对药物的外排能力,诱导MCF-7细胞对阿霉素耐药。


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