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Compound 48/80对apoE基因敲除小鼠颈总动脉套环诱导斑块的影响

唐雅玲  
【摘要】:[目的] 肥大细胞与动脉粥样硬化的关系研究目前主要是病理学观察和细胞学实验。本课题拟采用肥大细胞脱颗粒剂——Compound 48/80作用于颈总动脉套环的apoE基因敲除(apoE~(-/-)小鼠,以在动物学实验水平探讨肥大细胞脱颗粒对斑块的影响及其可能机制。 [方法] 40只10周龄apoE~(-/-)小鼠给予高脂高胆固醇饲料饲养,2周后行右颈总动脉套环术。采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,取颈正中切口,剥离双侧颈总动脉,在右颈总动脉套上内径0.3mm、长1.0cm的硅胶管,并用三根丝线束紧硅胶管,导致管腔狭窄,术毕,缝合伤口,放置笼中。术后4周,随机分为2组,每组20只,实验组小鼠腹腔注射Compound 48/80(0.5 mg/kg),对照组小鼠腹腔注射相同体积的D-hank’s,隔日一次,共4次。第4次注射后30min,安乐死处死动物,摘眼球取血,分离血清,采用酶法测定血清脂质含量,采用比色法测定血清类胰蛋白酶活性。小鼠原位灌流固定,取双侧颈总动脉置10%中性缓冲福尔马林中固定,石蜡包埋,连续切片,HE染色。套环侧颈总动脉石蜡切片进行甲苯胺蓝染色,a-smooth muscle actin、Mac3、IL-1β、vWF、VE-cadherin免疫组织化学染色,bFGF原位杂交、免疫荧光染色。HMIAS2000高清晰度彩色医学图


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