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MAPK、PKB调节γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病中的作用

申严  
【摘要】:目的:通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者和大鼠肺内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、蛋白激酶B(PKB)与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达,研究MAPK、PKB通路和γ-GCS的关系及其在COPD发病中可能的参与机制,从而为防治COPD这一顽固性疾病找到新的靶点。 方法:分动物实验和临床实验。1.动物实验:健康雄性Wistar大鼠28只,随机分COPD模型组和对照组,每组14只。采用每日熏香烟和两次气管内滴入脂多糖(LPS)法制作COPD大鼠模型。测定大鼠肺功能并观察大鼠肺组织病理形态学改变;检测大鼠肺组织中γ-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCSmRNA的表达,免疫组化和western印迹分析肺组织中γ-GCS与磷酸化的细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK、PKB蛋白水平。2.临床实验:手术切除肺癌患者肺组织标本18例,所有患者术前均行肺功能检测,COPD诊断采用中华医学会2002年制定的标准,其中COPD组和对照组各9例,检测肺组织中γ-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCS mRNA的表达,免疫组化分析肺组织中γ-GCS与磷酸化的ERK、JNK、p38MAPK、PKB蛋白水平。 结果 1.COPD组大鼠PEF和FVE_(0.3)较对照组降低(P0.05)。COPD组大鼠小气道阻力增加,肺通气功能障碍;病理学上符合慢性阻塞性肺气肿改变。 2.COPD大鼠模型组中γ-GCS活性明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。 3.COPD组大鼠支气管、肺泡上皮细胞和小动脉平滑肌细胞胞浆中γ-GCSmRNA呈强阳性表达;对照组在相应部位呈弱表达或不表达,两组图像吸光度比较差异有统计学意义(P0.01)。


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