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补肾醒脑方对血管性痴呆模型大鼠炎性反应调控研究

胡久略  
【摘要】:目的:通过复制反复性缺血再灌注VD模型,观测补肾醒脑方(BSXNP)对血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆、脑组织病理形态学,脑组织炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β,黏附分子ICAM-1、VCAM-1. P-selectin、E-selectin,胆碱能抗炎通路中CHAT、AchE与炎症因子的关系及NF-K B变化的影响,研究BSXNP对VD模型大鼠炎性反应的调控作用,进一步探讨BSXNP防治VD的作用机理。 方法: 第一部分:BSXNP对VD模型大鼠行为学及脑组织病理形态学的影响 实验以反复缺血再灌注致VD模型大鼠为研究对象,以喜得镇组为对照组,将雄性Wistar大鼠随机分为模型组(MX)、假手术组(JS)、喜得镇组(XD)补肾醒脑方组(BX),用跳台法、水迷宫法分别于术后第7d、15d、30d观察各组大鼠学习记忆能力;于行为学实验结束后第二天,断头取大鼠脑组织,经HE染色观察各组大鼠脑组织病理形态学变化。 第二部分:BSXNP对VD模型大鼠炎性反应的阻抑作用 实验以反复缺血再灌注致VD模型大鼠为研究对象,以喜得镇组为对照组,将雄性Wistar大鼠随机分为MX、JS、XD、BX,于术后24小时取脑组织,运用ELISA法检测炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β,黏附分子ICAM-1、VCAM-1、P-selectin、E-selectin含量,运用比色法检测CHAT、AchE活力,运用蛋白印迹法检测NF-κB表达。 结果: 第一部分:BSXNP对VD模型大鼠行为学及脑组织病理形态学的影响 1.BSXNP能明显改善VD模型大鼠的学习记忆能力。BSXNP能明显缩短VD模型大鼠不同时间段跳台实验中触电反应期,延长触电潜伏期(P0.01);同时均可明显减少VD模型大鼠不同时间段学习和记忆成绩中的错误反应次数(P0.01);还可缩短VD模型大鼠在Morris水迷宫中寻找平台潜伏期,增加跨越平台次数(P0.01或P0.05)。且BSXNP组明显优于喜德镇组,差异具有统计学意义(P0.05)。 2.BSXNP能明显改善或减轻VD模型大鼠脑组织神经元的损伤,对脑神经细胞具有保护作用。 第二部分:BSXNP对VD模型大鼠炎性反应的阻抑作用 1.BSXNP能显著降低VD模型大鼠脑组织促炎因子TNF-α、IL-1β的含量(P0.05),明显降低抗炎因子IL-10、TGF-β的含量(P0.05)。 2.BSXNP能不同程度的降低VD模型大鼠脑组织粘附分子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、P-select in含量(P0.05或P0.01),减轻缺血再灌注损伤。 3.BSXNP能够提高VD模型大鼠脑组织ChAT活性(P0.05),降低脑组织AchE活性(P0.01),提示其可能亦作用于“迷走神经—胆碱能抗炎通路”,通过缓解VD模型大鼠迷走神经受到的抑制作用,使Ach的合成增多,减轻炎性反应,从而减少脑组织功能受损。 4.BSXNP能抑制脑缺血再灌注后核转录因子-κB的的转录活性,下调NF-κB的表达,阻断炎症反应信号转导通路,减轻炎性损伤。 结论:1.BSXNP能明显改善VD模型大鼠的学习记忆能力,减轻脑组织神经元的损伤,对脑神经细胞具有保护作用。 2.本研究表明,在反复脑缺血再灌注后,炎症因子表达迅速上升,内皮细胞粘附分子增加,胆碱能抗炎通路未激活,核转录因子活化,从而引起脑组织损伤。给予BSXNP能阻断炎性反应信号转导通路,进而减轻炎症损伤。此表明脑缺血再灌注后出现的白细胞与内皮细胞粘附,炎性细胞聚集、浸润,炎症反应加重,微血管拥堵等是其组织病理基础之一;通过调控脑缺血再灌注后早期炎性反应是BSXNP治疗VD的重要作用机理之一,其可能机制是:BSXNP通过阻断NF-κB炎性反应信号转导通路和激活胆碱能抗炎通路,从而共同调节了炎性因子和黏附因子的表达,通过多通路、多靶点、多环节作用于炎症通路而实现调控炎性反应作用的。


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