收藏本站
收藏 | 论文排版

杜仲皮有效成分与其内生真菌的相关性研究

梁雪娟  
【摘要】:目的通过采集几个代表性产地的杜仲树皮,比较其内生真菌的种群结构差异;研究不同季节杜仲皮内生真菌的种群结构及其与外部环境因子的相关性;构建不同产地杜仲皮的HPLC/Q-TOF-MS指纹图谱,比较不同产地、不同季节杜仲皮中成分及含量的差异性,分析不同季节有效成分的动态积累变化,并分析这种差异与杜仲皮组织中内生真菌种群之间的相关性;同时,分析代表性内生菌株发酵产物中化学成分,将其与杜仲皮中化学成分进行比较,为探索杜仲皮内生真菌与宿主之间相互作用关系提供了一定的思路及线索。 方法(1)采用平板分离法分离来自慈利、略阳和遵义三个产地的杜仲干皮内生真菌,通过形态和分子手段相结合的方式对分离出的真菌进行鉴定,统计不同产地杜仲皮内生真菌菌株数,并计算其多样性指数及相似度,采用Clustal X1.81进行多重序列对比,再利用MEGA5.1软件进行系统发育分析,构建邻接树。同时,采用Kimura2-parameter model对同属的序列构建遗传距离矩阵。(2)采用与不同产地内生真菌研究相同的方法,对不同季节杜仲皮内生真菌进行分离及鉴定,统计不同季节内生真菌菌株及种群数,计算不同季节内生真菌的多样性及相似度,并运用Canoco生态学统计软件,对不同季节内生真菌的种群结构与其气候因子的相关性进行分析。(3)采用HPLC/Q-TOF-MS技术建立不同产地杜仲皮HPLC/Q-TOF-MS液质联用指纹图谱,运用SPSS软件进行聚类分析,寻找不同产地的差异。(4)应用HPLC/Q-TOF-MS方法,对采集的不同产地及不同季节杜仲药材进行含量测定,运用SPSS16.0统计软件,以各菌属的相对频率为自变量,PDG、Au或GPA的含量为应变量,将杜仲皮中有效成分与其内生真菌种群结构进行相关与回归分析,评估杜仲皮内生真菌与宿主有效成分之间的关系。(5)采用HPLC/Q-TOF-MS技术对分离得到的代表性内生菌株发酵产物进行检测,并与杜仲样品进行对比,寻找相同或相似代谢产物。 结果(1)从三个产地杜仲皮中共分离得到152株内生真菌,分属于8个属,其中Phomopsis、Diaporthe、Alternaria为三个产地内生真菌共有属,各产地的优势种群不同。相似性分析表明,不同产地杜仲皮内生真菌的组成结构上存在差异;多样性及均匀度分析表明,慈利和略阳产地杜仲皮内生真菌种群多样性较高,分布较均匀。遵义产地杜仲皮内生真菌种群的多样性指数及均匀度指数最低,优势种群集中,奇异度较高。拟茎点菌属与其有性态间座壳属菌株的系统发育及遗传距离分析,不同产地杜仲皮中拟茎点菌属及其有性态真菌多样性丰富。(2)多样性分析结果表明,11月和1月的杜仲皮内生真菌种群多样性丰富,分布较均匀,而3月和7月杜仲皮中内生真菌优势菌群集中,奇异度较高,种群较单一。影响杜仲皮内生真菌季节差异的重要气候因子为最小相对湿度、降水量、平均相对湿度,不同种属内生真菌受气候因子影响存在较大差异。(3)不同产地的15批药材有22个共有峰,通过数据比对及质谱分析,鉴定14个特征峰,对指纹图谱的聚类分析结果显示云南和四川产杜仲皮与其他产地之间差异性较大。(4)不同产地5种主要有效成分含量差异较大,略阳产地和慈利产地质量较优。季节变化的规律显示,3、5月份杜仲皮中有效成分含量较高,质量较佳。内生真菌种群结构与宿主杜仲皮中有效成分的相关与回归分析表明,拟茎点菌属和间座壳属内生真菌与5种有效成分含量密切相关,正负影响因成分的不同而有所差异。(5)从五种杜仲皮内生真菌的发酵产物及杜仲样品的总离子流图与紫外图的对比上,发现4处共有峰,但通过质谱分析,未找到内生菌株发酵产物与杜仲皮提取物中相同的化学成分,还有待进一步的研究。 结论杜仲皮组织中的内生真菌具有多样性,不同产地及不同季节内生真菌的数量、组成及种群间存在显著差异;影响不同季节杜仲皮中内生真菌种群差异的主导气候因子为最小相对湿度、降水量、平均相对湿度;不同产地杜仲皮中的化学成分组成及含量存在差异,主要有效成分含量的差异性与杜仲皮的内生真菌密切相关,其中拟茎点菌属和间座壳属的真菌对杜仲皮中有效成分影响较大;对五种杜仲皮内生真菌发酵产物检测未发现与杜仲皮中相同的化学成分,推测内生真菌对宿主化学成分为间接影响,二者互作机制有待进一步研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈文德;彭培好;王丽华;李万平;;杜仲对重金属元素富集特征研究[J];四川林勘设计;2007年03期
2 杜红岩,谢碧霞,孙志强,杜兰英;不同变异类型杜仲皮含胶性状的变异规律[J];中南林学院学报;2004年02期
3 彭密军;张敏;周春山;朱炯波;;高效液相色谱-质谱法测定杜仲样品中环烯醚萜含量[J];分析测试学报;2006年01期
4 潘莹;;D-101-1大孔树脂吸附纯化杜仲总黄酮研究[J];安徽农业科学;2010年15期
5 吴春,胡小妹,陈林林,聂芊;杜仲黄酮的提取及抗氧化活性研究[J];哈尔滨商业大学学报(自然科学版);2004年05期
6 张志勇;唐云安;方向京;和丽萍;;矿区废弃地土壤与杜仲重金属污染状况相关性研究[J];安徽农业科学;2010年15期
7 李强;唐微;郑伟;孙剑;;杜仲粗多糖脱蛋白方法的对比研究[J];食品工业科技;2011年03期
8 杨尤政;;树皮药材的采收与初加工法[J];农家科技;1999年09期
9 董娟娥;马希汉;;反相高效液相色谱法同时分离测定杜仲雄花及其产品中的京尼平苷酸和绿原酸[J];色谱;2007年02期
10 卢定强;赵辉;王俊;蒋奔;王加力;凌岫泉;刘骥;;基于杜仲的全生物炼制研究进展[J];现代化工;2009年03期
11 ;杜仲粉产品开发[J];农村实用技术与信息;1999年03期
12 戚向阳;陈维军;张声华;;杜仲中双环氧木脂素二糖苷分离纯化技术的研究[J];林产化学与工业;2005年04期
13 柳娜;陈晓青;;杜仲中环烯醚萜类化合物的快速制备色谱制备及反相高效液相色谱/核磁共振鉴定[J];精细化工;2006年03期
14 杨帅;杨合超;杨长长;;杜仲山楂鸭的加工制作方法[J];肉类研究;2006年11期
15 孙凌峰;杜仲树叶资源的开发利用[J];林产化工通讯;1998年04期
16 袁菊丽;;超声提取杜仲多糖的工艺优化[J];应用化工;2011年05期
17 李勇革;;杜仲的繁殖与栽培技术[J];绿色大世界;1997年04期
18 ;食品及农副产品加工[J];中国乡镇企业技术市场;1998年11期
19 戚向阳;陈维军;张声华;彭光华;;杜仲粉的药理作用及其有效成分特性研究[J];中国食品学报;2002年04期
20 陆长根;盛宁;李维林;;复方杜仲胶囊的研制[J];时珍国医国药;2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 姚宗凡;;杜仲资源开发利用及栽培[A];中国自然资源学会天然药物资源专业委员会成立大会暨第一次学术研讨会会刊[C];1994年
2 侯惺;吕文海;;近十年杜仲药理研究述要[A];中华中医药学会中药炮制分会2008年学术研讨会论文集[C];2008年
3 孙凌峰;;杜仲树叶的化学成分及其利用[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(上册)[C];1999年
4 黄友谊;杨晓萍;胡伟;宁祖林;;花香型杜仲混合茶配比研究[A];湖北茶产业发展纵论[C];2008年
5 吴中能;刘德胜;;杜仲人工林丛干对皮、叶产量影响的研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册)[C];2001年
6 陆长根;盛宁;李维林;贺善安;;复方杜仲胶囊的研制[A];药用植物研究与中药现代化——第四届全国药用植物学与植物药学术研讨会论文集[C];2004年
7 裴红宾;;不同用途杜仲林技术经济分析[A];中国林业技术经济理论与实践[C];2006年
8 王丽楠;杨美华;;不同部位、不同生长年限杜仲有效成分的含量变化(摘要)[A];全国第8届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2008年
9 程军;侯丽娟;陈均;;薄层扫描法测定杜仲叶中桃叶珊瑚甙的含量[A];中国中医药学会建会20周年学术年会专辑(下)[C];1999年
10 宋莎莎;宋小妹;;炮制方法对杜仲中松脂醇二葡萄糖苷与绿原酸含量的影响[A];中华中医药学会中药炮制分会2008年学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 刘世会;杜仲蛋白纯化、序列分析及抗菌活性研究[D];贵州大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁雪娟;杜仲皮有效成分与其内生真菌的相关性研究[D];湖南中医药大学;2014年
2 赫锦锦;杜仲皮及雄花中次生代谢产物的变化规律研究[D];河南大学;2010年
3 徐咏梅;外源激素对杜仲次生代谢物含量的影响[D];西北农林科技大学;2007年
4 郭满满;杜仲皮、叶及其几种活性成分热分析研究[D];吉首大学;2013年
5 苑子夜;杜仲叶抗氧化性及主成分合成积累动态研究[D];西北农林科技大学;2011年
6 丁奋霞;利用微生物发酵提取杜仲胶的研究[D];西北农林科技大学;2011年
7 刘昌勇;杜仲主要活性成分形成积累及其营养调控技术研究[D];中国林业科学研究院;2011年
8 胡文彬;杜仲中京尼平苷酸和松酯醇二葡萄糖苷的分离及多种成分同时检测方法[D];中南林业科技大学;2012年
9 姜交龙;杜仲内生真菌的分离及其代谢产物抑菌性质研究[D];江南大学;2013年
10 贾磊;杜仲对促进胶原蛋白的合成与提高运动能力的研究[D];西北师范大学;2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 刘君祥;陇南打造西部杜仲产业体系[N];农民日报;2011年
2 叶忠孝;强壮筋骨 首选杜仲[N];医药养生保健报;2008年
3 马志超 程俊杰 商玉玲;植物的“活化石” 致富的“金钥匙”[N];河南日报;2007年
4 宝建;杜仲有效成份多[N];上海中医药报;2007年
5 陈柯 龚志伟;四川旺苍双管齐下助力杜仲产业[N];中国质量报;2006年
6 廖伟坤 许建红;了解杜仲自然变异类型有助基础鉴别[N];中国中医药报;2006年
7 本报记者 丁洪美;科技列车行驶在贵州大地[N];中国绿色时报;2008年
8 程光丽;杜仲有效成分和药理作用逐渐清晰[N];中国医药报;2006年
9 河南农业大学 高致明 教授 提供;杜仲银杏叶饮料[N];河南科技报;2006年
10 特约记者 邓海燕 朱雅雄;解决天然胶短缺有新途径[N];中国化工报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978