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补肾活血方对自身免疫性卵巢早衰模型小鼠基因表达及卵巢修复的影响

李花  
【摘要】:目的:实验以小鼠为研究对象,观察补肾活血方对卵巢早衰模型小鼠AMH、BMP-15mRNA表达的影响,探讨该方干预卵巢早衰作用的分子机制,为临床应用和进一步的新药开发研制提供实验依据。 方法:将66只雌性Balb/c小鼠,随机选出11只为空白组,予生理盐水灌胃,其余55只用小鼠透明带3(ZP3)进行免疫造模,建立卵巢早衰模型,将造模成功小鼠采用随机方法分到西药组、模型对照组、补肾活血方高、中、低剂量组(简称中高、中中、中低组),各组分别予补佳乐、生理盐水、补肾活血方高、中、低浓度药液灌胃,每鼠每天灌胃0.3mL,每连续灌胃6天,休息1天,持续4周后测量小鼠体重,眼球采血及颈椎脱臼处死小鼠,采集标本。光镜下观察卵巢组织学变化,用ELISA法检测以下血清性激素水平:卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E:);用RT-PCR法检测卵巢组织抗苗勒管激素基因AMH mRNA、生长分化因子-15基因BMP-15mRNA的表达水平。 结果: (1)血清FSH、LH水平:与模型对照组相比,中高、中中、中低剂量组FSH、LH均明显低于模型对照组(P0.01);与西药组比较,中高组FSH、 LH较低(P0.01)。 (2)血清E2水平:与模型对照组相比,其余各组血清E2均显著升高(P0.01);与西药组比较,中高组值稍高,但无统计学意义(P0.05)。 (3)小鼠一般情况比较:与空白组比较,西药组体重增加,差异有高度统计学意义(P0.01)。模型对照组小鼠精神状态萎靡,其余各组小鼠精神状逐渐好转,体重增加,以中高组、西药组小鼠表现最佳。 (4)卵巢病理组织形态:中高组与西药组卵巢组织形态改变类似,均见各级发育卵泡,排卵前卵泡较多,闭锁卵泡较模型组减少。 (5) AMH mRNA:与模型对照组比较:中高、中中、中低组小鼠AMH mRNA表达均增加(P0.05);与西药组比较,中高组值稍高(P0.05),但无统计学意义。 (6) BMP-15mRNA:与模型对照组比较:中高、中中组AMH mRNA表达均增加,(P0.01);与西药组比较,中高组值偏高,差异有显著统计学意义(P0.01)。 结论: 1.补肾活血方能够促进卵巢早衰小鼠卵泡的生长及卵巢修复,改善内分泌及卵巢功能,其中以高剂量效果明显,且优于西药。 2.补肾活血方治疗卵巢早衰的作用机制:可能是提高卵巢AMH、BMP-15mRNA的表达,促进早期卵泡增生发育,提高卵巢的储备功能,从而抑制卵巢功能的过早衰竭。


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