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枳术丸对STC模型小鼠结肠组织AchE、5-HT7R及水通道蛋白表达的影响

樊俊阳  
【摘要】:[目的] 探讨番泻叶+限水+控制饮食法制作脾虚证慢传输型便秘(STC)小鼠模型的可行性,并通过观察枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠组织AchE、5-HT7R及水通道蛋白表达的影响进而探讨枳术丸调节肠道运动的可能作用机制。 [方法] 首先,建立脾虚证STC模型:将80只SPF级昆明小鼠随机分成正常组(20只)和造模组(60只),造模组第1d-7d,用番泻叶按20g/(kg·d)灌胃,灌胃浓度为1kg/L,第8d起停用番泻叶,隔天喂生大米4-8g,隔天饮水1次,每次0.5h,共8天。造模成功后,模型小鼠随机分为模型组、枳术丸高、低剂量组、麻仁胶囊组、莫沙必利组,造模第16天起给药7d后,检测各组小鼠的一般行为学特征、首粒黑便传出时间、6h排便数量及质量、血清D-木糖含量及结肠黏膜组织病理学特征;免疫组化法检测AchE、5-HT7R及水通道蛋白表达;Real-time PCR检测5-HT7R及水通道蛋白mRNA表达。 [结果] 1、模型组小鼠体重明显低于正常对照组,各治疗组均能够增加脾虚便秘小鼠的体重,差异有统计学意义(P0.01)。2、排便实验观察:与正常组比较,模型组首粒黑便排出时间显著增加,差异有统计学意义(P0.01);(2)枳术丸高、低剂量、麻仁胶囊组及莫沙必利组首粒黑便排出时间较模型组均明显缩短,差异有统计学意义(P0.01),但以枳术丸低剂量首粒黑便排出时缩短最为显著;而枳术丸高剂量组与麻仁胶囊组间比较无明显差异(P0.05);枳术丸高、低剂量组及麻仁胶囊组和莫沙必利组比较,差异有显著统计学意义(P0.01),3、血清D一木糖含量:模型组与正常对照组比较血清D-木糖含量显著降低,枳术丸高、低剂量及麻仁胶囊组血清D-木糖含量与模型组比较均明显增高,差异有统计学意义(P0.01),而莫沙必利组血清D-木糖含量回升不明显,差异无统计学意义(P0.05)。4、免疫组化及Real-time PCR检测结果:与正常组比较,模型组AchE含量降低,而5-HT7R、AQP4、AQP8含量升高,枳术丸低剂量组AchE含量较其他组升高,而5-HT7R及AQP4、AQP8含量较其他组降低,差异均有统计学意义(P0.01)。 [结论] 1、脾虚证慢传输型便秘存在肠神经递质和AQPs表达的异常,即结肠组织中AchE的表达降低,5-HT7R表达增加,AQP4、AQP8表达增加。 2、对于脾虚证慢传输便秘而言,枳术丸可以明显起到健脾通便的作用。 3、枳术丸治疗后能提高脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠组织中AchE的表达,降低5-HT7R的表达而促进肠道运动,降低AQP4、AQP8的表达减少结肠对水分的重吸收,进而使粪便含水量增高,达到治疗便秘目的。 4、枳术丸治疗脾虚证慢传输型便秘可能是通过综合调控肠神经递质(AchE、5-HT7R)和水通道蛋白(AQP4、AQP8)的表达而实现。


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