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黄芪解毒汤干预乳腺癌细胞凋亡及影响Notch信号转导通路活性的实验研究

吴世婷  
【摘要】:目的:探讨黄芪解毒汤体外干预人乳腺癌细胞MCF-7凋亡及对Notchl.Jagl基因和Cycl inDl蛋白表达影响,揭示本方抑制乳腺癌复发转移的作用机制。 方法:首先制备含药血清,12只雌性SD大鼠随机分为黄芪解毒汤含药血清组、阿霉素含药血清组、参一胶囊含药血清组、生理盐水血清组。并分别以等量黄芪解毒汤浓缩液、阿霉素溶液、参一胶囊溶液、生理盐水予大鼠灌胃3天,每天两次。于第四天第7次灌胃后,水合氯醛麻醉,腹主动脉取血后制备含药血清。以含药血清干预人乳腺癌细胞MCF-7,并以MTT检测不同含药血清对细胞抑制的影响,流式细胞仪检测其在体外实验中对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响,RT-PCR检测Notchl及Jag1基因,Western-blot检测CyclinDl蛋白表达的影响。以实验探究黄芪解毒汤防治乳腺癌的机理。 结果: 1.MTT:与生理盐水血清组比较,加入含药血清的组别均具有一定诱导MCF-7细胞凋亡的作用,除5%浓度外含药血清组的OD值与其生理盐水血清组比较差异均有统计性意义(P0.05),且阿霉素组抑制率最高,其次为黄芪解毒汤组,最后为参一胶囊组; 2.流式细胞仪测细胞凋亡:含药血清的组别均具有一定诱导MCF-7细胞凋亡的作用其与生理盐水组间差异有统计学意义(P0.05),且阿霉素组凋亡率最高,其次为黄芪解毒汤组,最后为参一胶囊组; 3.RT-PCR检测Notchl及Jag1基因表达:生理盐水血清组相比,被含药血清干预的细胞中Notchl及Jag1基因表达明显降低且有统计学意义(P0.05),且阿霉素组表达最低,其次为黄芪解毒汤组,最后为参一胶囊组; 4.West ern-blot检测CyclinDl蛋白表达:与生理盐水血清组相比,含药血清干预后的细胞中CyclinDl蛋白表达减少,且阿霉素组表达最低,其次为黄芪解毒汤组,最后为参一胶囊组。 结论: 1.黄芪解毒汤可诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡;2.黄芪解毒汤可显著降低人乳腺癌细胞MCF-7Notchl. Jagl基因的表达: 3.黄芪解毒汤可显著降低人乳腺癌细胞MCF一7CyclinDl蛋白表达; 为黄芪解毒汤在乳腺癌术后治疗中的作用提供实验依据。


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