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肾特灵配合泼尼松对阿霉素肾病大鼠肾小球电荷屏障、nephrin的影响研究

姜海斌  
【摘要】: 目的 1、探讨阿霉素肾病模型的改良方法,建立稳定的肾病大鼠模型。 2、通过动物实验,观察药物对阿霉素肾病大鼠模型电荷屏障、nephrin的影响,探讨肾特灵加泼尼松治疗肾病综合征的作用机制。 方法 1、采用大鼠尾静脉一次性注射阿霉素7.5mg/kg的方法建立大鼠肾病模型。检测24h尿蛋白定量、血清总蛋白、白蛋白、胆固醇、尿素氮及肌酐;剖腹取左肾,留取肾组织标本,用于电镜、光镜检查。 2、将大鼠随机分为对照组(10只)和造模组(30只)。大鼠尾静脉一次性注射阿霉素7.5mg/kg建立大鼠肾病模型。造模后第14d,将造模组大鼠按尿蛋白量先分层再随机分为模型组、泼尼松组、肾特灵加泼尼松组,每组10只。给予药物干预,检测24h尿蛋白定量、血清总蛋白、白蛋白、胆固醇、尿素氮及肌酐;采用PEI、AB染色法检测电荷屏障;采用反转录—聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测nephrin。 结果 1、造模组尿蛋白量逐渐增多,胆固醇、尿素氮、肌酐升高,均于第28d达到高峰;血总蛋白、白蛋白下降,第28d天达到最低值;肾小球光镜下无明显改变,电镜下改变明显。对照组未见病变。 2、给药后,模型组24h尿蛋白量逐渐升高,在第28d达到高峰,在同一时间点泼尼松组、肾特灵加泼尼松组均明显低于模型组。肾特灵加泼尼松组与泼尼松组相比,尿蛋白定量、血清白蛋白、胆固醇、尿素氮、肌酐有统计学意义。电镜下可见模型组大鼠肾小球电荷屏障明显改变;肾特灵加泼尼松组与泼尼松组比较,肾小球AB深染色及电荷屏障改变有差异。与对照组相比,模型组nephrin下调70%、泼尼松组nephrin下调38%、肾特灵加泼尼松组nephrin下调22%。 结论 1、采用一次性大鼠尾静脉注射7.5mg/kg阿霉素的方法可成功的建立阿霉素肾病大鼠模型,且具有缩短实验时间、其表现与人类肾病综合征表现更接近的优点。 2、阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞足突的结构改变早于尿蛋白的发生,其严重程度与尿蛋白排出量相一致。 3、电荷屏障的损伤、nephrin的表达减少是大量蛋白尿的主要原因。 4、肾特灵加泼尼松治疗肾病综合征的作用机制之一是修复电荷屏障的损伤、提高肾小球细胞nephrin的表达,其治疗作用优于单纯使用泼尼松。


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