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红车轴草总黄酮有效部位分离纯化工艺研究

李斌  
【摘要】: 目的:研究溶剂法分离纯化红车轴草中总黄酮的工艺,将红车轴草提取物总黄酮含量由17.29%提高到50%以上。 方法:①采用高效液相色谱法测量红车轴草粗提物中芒柄花素和鹰嘴豆芽素的含量,以ODS C_(18)分析柱分离测定,以甲醇-水(60∶40)为流动相,以260nm为检测波长,以外标法测定。②70%乙醇对粗提物进行提取,以除去脂溶性的杂质和色素。用乙酸乙酯对醇提干膏进行提取。然后用碱水溶液对乙酸乙酯提取液进行萃取,以分离黄酮类成分和其他成分,采用正交试验对醇提条件,乙酸乙酯提取条件及碱水萃取条件进行优化。 结果:①高效液相色谱法测得红车轴草粗提物总黄酮含量为17.29%,芒柄花素和鹰嘴豆芽素在0.13μg-1.2μg范围内呈良好的线性关系,二者峰面积(Y)对进样量(X)的直线回归方程分别为:鹰嘴豆芽素Y=36.93X-0.101(r=0.9998);芒柄花素Y=34.40X-0.105(r=0.9999)。②乙醇提取最优条件为:70%的乙醇在80℃温度下提取3次,每次溶剂用量(mL)分别为粗提物重量(g)的40倍、20倍、20倍,每次提取1.5h;乙酸乙酯提取的最佳工艺为:乙酸乙酯用量(mL)为醇提浸膏重量(g)的30倍、20倍、10倍,在80℃温度下提取3次,每次1.5h;碱水萃取的最佳条件为:乙酸乙酯液浓缩至2/3体积,用5%Na_2CO_3溶液萃取3次,每次用量相当于乙酸乙酯提取液原体积的1.6倍,碱水液盐酸调pH值5~6。 结论:溶剂法分离纯化红车轴草粗提物总黄酮,工艺简单,符合工厂生产实际,可以生产出总黄酮含量大于50%的产品,总黄酮的转移率为65.67%。


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