收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

一株枯草芽胞杆菌的分离鉴定及其杀虫活性的研究

刘慰  
【摘要】:鳞翅目(Lepidoptera)是一种世界性危害广的害虫,每年给全球造成上亿美元的损失。因此深入挖掘丰富的菌株资源,筛选具有广谱高效杀虫毒力的菌株,对构建广谱高效工程菌、研制环保微生物杀虫剂具有重要的理论及实践意义。 本论文以从土壤中自行分离的219株芽胞杆菌中筛选的一株枯草芽胞杆菌为研究对象,通过菌落形态观察、光学显微镜、激光共聚焦显微镜等进行镜检菌体形态以及16S rRNA基因同源性分析等一系列方法鉴定,该株细菌属枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis,命名为HX08,并将其16S rRNA基因序列提交上Genbank数据库,获得了登陆号KF774302。 同时,从该菌株的生理生化特性方面进行了验证,如革兰染色实验、柠檬酸盐利用、明胶液化、吲哚实验、甲基红实验、V.P实验、卵磷脂酶实验、淀粉水解实验、纤维素水解实验、L-阿拉伯糖水解实验、D-葡萄糖水解实验、D-木糖水解实验等。并对该菌株的生长特性进行了一系列初步研究,包括生长曲线、最适pH值、培养过程中pH值变化情况及抗生素抗性等。 研究了该菌株发酵不同时期下不同浓度的样品对棉铃虫幼虫(Helicoverpa armigera)的杀虫活性及致死毒力,结果发现,HX08菌株在60h发酵时间段对棉铃虫的致死效果最好。通过对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、铜绿杆菌、产气肠杆菌等多种病原细菌进行抑菌实验,发现该菌株在60h发酵时间段对鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌菌株的抑菌效果最明显。 对该菌株发酵液提取的活性蛋白进行了初步研究,建立了HPLC技术分离体系,使用H20做流动相,以0.5mL/min流速洗脱,检测波长分别为215nm、254nm和280nm,收集第15mL收集管处即保留时间为31min的2号峰粗分离物活性较高。并切取SDS-PAGE胶目的蛋白质条带酶解,利用质谱(LTQ-MS)技术进行了分子特性分析,鉴定发现杀虫活性蛋白成分为草酸脱羧酶。 本研究为丰富枯草芽胞杆菌菌种资源,挖掘微生物活性产物基因资源,进一步研究该菌的杀虫和抗菌活性物质奠定了重要基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 常维山,张春阳,牛钟相,朱立贤,谢幼梅;产蛋白酶枯草芽胞杆菌益生菌种的筛选与应用[J];中国畜牧杂志;2003年03期
2 刘芳,梁运祥;绿色荧光蛋白基因对枯草芽胞杆菌的标记[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2005年05期
3 王涛,王和;细胞壁缺陷枯草芽胞杆菌DPA合成代谢的研究[J];贵州医药;2005年06期
4 王慕华;孙文敬;赵峰梅;杨庆文;郭金权;杨林娥;;紫外诱变耐糖选育D-核糖高产菌株[J];微生物学杂志;2007年01期
5 王涛;王和;;细胞壁缺陷枯草杆菌酸溶性小分子芽胞蛋白及芽胞形成[J];贵阳医学院学报;2008年02期
6 金志雄;毛达勇;张珍;王金勇;;产α-淀粉酶菌株液体培养条件的探讨[J];环境科学与技术;2006年02期
7 范鑫;杨明明;曹鹏涛;张伟;张雯;宋秀平;龚月生;;外源木聚糖酶在枯草芽胞杆菌中信号肽筛选[J];微生物学报;2011年07期
8 罗进贤;廖武祥;谢朝晖;;枯草芽胞杆菌基因文库的构建[J];中山大学学报论丛;1990年02期
9 徐威,苏昕,李福德;碱性蛋白酶产生菌的筛选及发酵条件考查[J];生物技术;1997年03期
10 丁贤;殷波;刘广锋;周世宁;;细菌群体感应抑制活性微生物Zou 03的筛选与鉴定[J];中国微生态学杂志;2010年11期
11 姚海勇;华兆哲;堵国成;陈坚;;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)过氧化氢酶的分离纯化及性质[J];应用与环境生物学报;2008年06期
12 王建玲;赵丛;杜连祥;;枯草芽胞杆菌突变株ZC-7中性蛋白酶催化区域氨基酸突变导致其活力提高[J];生物技术通讯;2009年04期
13 徐晖;魏培莲;;枯草芽胞杆菌微生态制剂的研制[J];氨基酸和生物资源;2008年02期
14 马宏宇;李菁菁;祁高富;喻子牛;赵秀云;;蛋白酶产生菌的化学诱变及酶学性质[J];华中农业大学学报;2010年06期
15 罗秀针;施碧红;郑虹;吴伟斌;施巧琴;;枯草芽胞杆菌FB123细菌素的理化性质及抑菌谱的研究[J];微生物学杂志;2008年01期
16 匡逢春;郑重谊;谭周进;谢达平;肖冰梅;谢丙炎;;影响枯草芽胞杆菌和荧光假单胞菌原生质体再生的因素[J];生物技术通讯;2008年05期
17 李倩;宁德刚;吴春笃;;以CotX为分子载体在枯草芽胞杆菌芽胞表面展示绿色荧光蛋白[J];生物工程学报;2010年02期
18 彭艳红;张梁;丁重阳;王正祥;石贵阳;;重组枯草芽胞杆菌不对称还原产d-伪麻黄碱[J];生物工程学报;2011年07期
19 王立梅;杨秀芬;曾洪梅;邱德文;郭立华;刘峥;;蛋白激发子PeaT1在枯草芽胞杆菌中的分泌表达及重组菌株提高小麦抗旱和促生的作用[J];生物工程学报;2011年09期
20 陈海龙;潘译孚;唐月薇;林资城;利运章;任美茌;徐金娜;邹泽红;黄薇薇;;提高枯草芽胞杆菌7171—6—1肌苷产率的研究[J];微生物学杂志;1984年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 胡小加;江木兰;张学江;;枯草芽胞杆菌在油菜根茎叶的定殖动态和生防作用研究[A];廿一世纪微生物学发展前沿与应用新技术研讨会论文摘要集[C];2003年
2 晋婷婷;唐玮;陈向东;;枯草芽胞杆菌BG2036胞外释放DNA现象与其缺陷性原噬菌体PBSX的相关性研究[A];基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2009年
3 韩冬梅;班慧芳;余子全;喻子牛;孙明;;新型抑菌蛋白APn5抑制胡萝卜软腐欧文氏菌[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
4 晋婷婷;赵明明;王轶;唐玮;陈向东;;枯草芽胞杆菌BG2036胞外释放DNA现象与其缺陷性原噬菌体PBSX的相关性研究[A];2010年第四届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
5 黄庆阳;佟伟霜;常缨;;香鳞毛蕨提取液抑菌作用的研究[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年
6 曹云鹤;乔家运;;枯草芽孢杆菌MA139β-甘露糖酶基因在毕赤酵母中的表达研究[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
7 龚建森;陆俊贤;吕晓娟;单艳菊;刘学贤;;枯草芽胞杆菌制剂对肉鸡生长性能与屠宰性能的影响[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
8 姚璐晔;堵国成;陈坚;;一株PVA降解酶产生菌的产酶条件的初步优化[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(上)[C];2006年
9 陈兰;;院内空气监测不合格相关因素分析[A];中国医院协会第十六届全国医院感染管理学术年会资料汇编[C];2009年
10 龚建森;陆俊贤;吕晓娟;单艳菊;刘学贤;;日粮添加枯草芽胞杆菌制剂SQ05对如皋黄鸡生长性能与屠宰性能的影响[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(上册)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈雄;枯草芽胞杆菌高产聚-γ-谷氨酸及其应用研究[D];华中农业大学;2005年
2 江昊;聚γ谷氨酸在枯草芽胞杆菌和大肠杆菌中的生物合成[D];华中农业大学;2007年
3 王启军;枯草芽胞杆菌B6-1产脂肽和聚-γ-谷氨酸及抗几种植物病原菌的研究[D];华中农业大学;2008年
4 林凌;产纤维素酶菌株的筛选和枯草芽胞杆菌内切葡聚糖酶催化活性的改造[D];华中农业大学;2009年
5 刘超;苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1520全基因组序列的初步分析[D];华中农业大学;2007年
6 朱莉;苏云金芽胞杆菌γ-氨基丁酸代谢旁路相关基因簇的结构与功能研究[D];中国农业科学院;2007年
7 吕敏;梣酮的杀虫活性及作用机理的初步研究[D];西北农林科技大学;2009年
8 傅经国;愈伤组织和冠瘿培养生物合成苦皮素A[D];郑州大学;2001年
9 武秋立;重组枯草芽孢杆菌生产核黄素发酵优化及代谢组学研究[D];天津大学;2007年
10 朱军;甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的光解及对杀虫活性影响的研究[D];南京农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘慰;一株枯草芽胞杆菌的分离鉴定及其杀虫活性的研究[D];湖南师范大学;2013年
2 王倩;枯草芽胞杆菌TR21的剂型应用技术研究和活性物质分离纯化[D];华中农业大学;2012年
3 彭灿;枯草芽胞杆菌TR21诱导香蕉产生的抗病生理生化特性[D];华中农业大学;2013年
4 田化平;海洋枯草芽胞杆菌DM03抗病原真菌物质的研究[D];华中农业大学;2009年
5 吴莉莉;cry2Ab基因载体的构建及其在枯草芽胞杆菌中的表达[D];福建农林大学;2012年
6 刘学明;枯草芽胞杆菌TR21的发酵和海洋细菌DM09的抗真菌活性物质研究[D];华中农业大学;2010年
7 吴成超;多酶型枯草芽胞杆菌的发酵工艺优化与应用研究[D];华中农业大学;2013年
8 王水明;进出境皮毛加工工艺pH和温度对杀灭病原微生物影响的调查[D];南京农业大学;2004年
9 吴园园;枯草芽胞杆菌NCD-2生物膜形成和芽胞形成相关基因的克隆及功能分析[D];河北大学;2013年
10 戴芳;堆肥改良剂—生物表面活性剂的开发与应用研究[D];湖南大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张国山;后微波炉时代:技术为王 [N];中华工商时报;2003年
2 吕纪增;灾后鱼虾蟹病害防治技术[N];中国渔业报;2006年
3 吕纪增;水灾后水产养殖管理要点[N];福建科技报;2006年
4 永年县农业局 高辉;马铃薯病虫害的“绿色防控”[N];河北科技报;2008年
5 中国保健科技学会功能水研究促进会专家委员会主任 梁映华;让你认识功能性离子水[N];科技日报;2003年
6 记者 秦倍钧;新材料板块欲当大盘先锋队[N];财经时报;2000年
7 中国农业大学 生吉萍 博士;警惕微生态制剂中存在的隐患[N];中国畜牧报;2003年
8 邵文杰;昆明植物所古植物化学研究获新进展[N];光明日报;2004年
9 刘仁;一种新型杀虫剂卖出2000万[N];中国知识产权报;2007年
10 龙明;更新换代中的杀虫剂[N];江苏农业科技报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978