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1.虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ天然突变体的分离与鉴定 　2.间斑寇蛛粗毒的生物化学研究

何小珍  
【摘要】：1.虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ天然突变体的分离与鉴定 虎纹捕鸟蛛[Selenocosmia(=Ornithoctonus)huwena]是分布在我国西南部山区的一个蜘蛛新种。它的粗毒中含有多个活性成分,其中研究的比较深入的多为神经毒素。虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ[huwentoxin-Ⅰ(简称HWTX-T)]是虎纹捕鸟蛛粗毒中含量最高的一种多肽类神经毒素。它含有33氨基酸残基,其中的6个Cys形成3对二硫键,能阻断突触前膜神经递质的释放,且能可逆阻断小鼠膈神经膈肌接头的传递,是一种N型钙离子通道阻断剂。 本部分研究通过阳离子交换及反相HPLC,从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离出HWTX-Ⅰ的一种天然突变体,MALDI-TOF质谱仪分析表明该天然多肽突变体分子量为3636 Da。Edman测序结合串联质谱和氨基酸组成分析等方法鉴定出该天然突变体由32个氨基酸残基组成,序列为H_2N-ACKGV FDACT PGKNE CCPNR VCSDK HKWCK WQ-COOH,其中6个Cys形成3对二硫键。该天然突变体氨基酸序列前31个残基与HWTX-Ⅰ的完全相同,第32位残基由HWTX-Ⅰ的K突变为Q,其生物学活性与HWTX-Ⅰ的有明显差异。昆明种小白鼠第四脑室注射实验表明,该天然突变体能使小鼠致死,但不能阻断小鼠膈神经-膈肌标本的神经肌肉接头传递。本研究结果表明,K32残基对于HWTX-Ⅰ的生物学活性有关键性作用。该天然突变体对HWTX-Ⅰ的结构与功能关系的研究具有重要意义。


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