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多糖类提取物及MF59佐剂对流感灭活疫苗免疫增强作用研究

谢国秀  
【摘要】:本论文由两部分组成:中药多糖类提取物对流感灭活疫苗的免疫增强作用研究;MF59佐剂于不同免疫途径下作流感灭活疫苗的佐剂效果比较研究。 (一)中药多糖类提取物对流感灭活疫苗的免疫增强作用研究 (1)枸杞多糖(LBP)、黄芪多糖(APS)对A/PR/8流感灭活疫苗的体液免疫应答作用研究。不同剂量的LBP (300μg、500μg和800μg)或APS(300μg和500μg),及100μg的氢氧化铝分别与A/PR/8疫苗混合,经i.p.或i.m.两条免疫途径共免疫小鼠两次,间隔三周。ELISA检测实验结果表明,LBP、APS无论经i.p.或i.m.免疫,均能明显提高小鼠的抗体滴度,且呈现一定的剂量依赖性;高剂量的LBP及APS佐剂效果与氢氧化铝相当。 (2)茯苓多糖(pachymaran)能否作为低剂量(0.015μg)或高剂量(1.5μg)A/PR/8流感灭活疫苗的佐剂,增强疫苗的免疫原性。不同剂量的pachymaran(200μg和100μg)或100μg的氢氧化铝与A/PR/8流感灭活疫苗经i.m.共免疫小鼠,一免后三周通过检测抗体水平、病毒攻击后小鼠的体重变化及保护率等几个方面检测其效果。结果如下: ①pachymaran对低剂量A/PR/8疫苗的佐剂效应 1000μg pachymaran IgG、IgG1、IgG2a抗体滴度均显著高于200μg pachymaran组和单独A/PR/8疫苗组;攻毒后明显降低了小鼠的体重丢失及肺部病毒量,提高小鼠的存活率,保护效果与氢氧化铝相当。 ②pachymaran对高剂量A/PR/8疫苗的佐剂效应 Pachymaran仍能提高小鼠的IgG.IgG1、IgG2a抗体滴度,效果却逊于铝佐剂组,然而病毒攻击后,其体重丢失率却与铝佐剂组差异不大。 (二)检测MF59于不同免疫途径下的佐剂效果。将MF59与A/PR/8疫苗混合,分别经i.p.、i.m.、i.v.和i.n.共免疫小鼠一次或两次,间隔三周,一免后四周或加强免疫后一周用致死量流感病毒攻击小鼠,检测小鼠血清抗体滴度、体重丢失率及保护率。结果表明i.p.优于i.m.;i.v.产生的抗体效价与i.m.相当,然而保护效果却逊于i.m.;i.n.最差。


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