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羊耳菊提取物抗菌及清除自由基作用研究

刘胜贵  
【摘要】:本论文研究目的在于评价羊耳菊提取物抗微生物活性和抗氧化能力,为民族植物广泛应用于传统医药系统提供科学依据。利用水和不同极性的有机溶剂制备羊耳菊根、茎、叶的提取物,采用药敏纸片扩散法、试管二倍稀释法,测定了羊耳菊根、茎、叶等不同器官对供试菌的抑菌圈直径和MIC值。以金黄色葡萄球菌、甲型副伤寒沙门氏菌为供试菌种,通过绘制杀菌曲线,研究了不同浓度羊耳菊提取物对细菌存活率随时间的变化关系,并研究了不同pH值条件下提取物的抗菌效果。探讨了超声波法提取羊耳菊叶黄酮的主要影响因素,通过L9(34)正交试验,研究了羊耳菊叶中黄酮类化合物提取的最佳工艺。采用水蒸汽蒸馏法提取羊耳菊的挥发油,利用气相色谱质谱联用法对该挥发油的化学成分进行分离鉴定,利用Fenton反应产生羟基自由基(OH')及邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基(O2(?)-),以比色法测定羊耳菊挥发油对这二种自由基的清除作用。结果表明:羊耳菊水和有机溶液提取物都具有较强的抑菌作用,抑制范围最广。羊耳菊水提取物对金黄色葡萄球菌的杀菌作用在较高浓度时并没有进一步提高杀菌速度,表现为时间依赖性抗菌作用,但对甲型副伤寒沙门氏菌表现为浓度性依赖抗菌作用。羊耳菊水提物最佳作用pH值为6-8.各试验因素对羊耳菊叶中黄酮类物质提取量的影响依次为乙醇浓度、提取时间、液料比。超声波法提取羊耳菊叶黄酮类化合物的最佳工艺为:在温度为60℃、乙醇浓度为70%、液料比为25:1条件下,超声提取3h,提取1次。羊耳菊根挥发油得率为0.486% (v/w),并初步确定了28种化合物的结构和相对含量。挥发油对羟基自由基(OH(?))和超氧阴离子自由基(O2(?)-)都有一定的清除能力,但清除羟基自由基(OH')的能力较强。研究表明:羊耳菊提取物体外试验证实了该民间药物具有抗菌活性和清除自由基能力,也表明了羊耳菊是一种有开发潜力的新抗菌药物资源。


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