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硫化氢对尿源性脓毒血症肾组织细胞因子表达的影响

杨磊波  
【摘要】:目的 建立尿源性脓毒血症兔模型;通过应用硫化氢干预,比较兔肾组织细胞因子的表达,明确外源性硫化氢对脓毒血症兔模型肾组织细胞因子的影响,从而揭示硫化氢在尿源性脓毒血症肾组织中发挥作用的可能机制。 方法 1、家兔左侧输尿管内注入大肠杆菌(ATCC25922),并结扎左侧输尿管远端,模拟上尿路急性梗阻并感染所致脓毒血症兔模型。 2、将48只健康雄性家兔随机分成4组,每组12只。正常组(Control组);假手术组(Sham组);脓毒血症组(Sepsis组);硫氢化钠组(NaHS组)。 3、每组动物按时间点又分为术后12小时、术后24小时、术后36小时、术后48小时4个时间点。分别于每个时间点观测肛温(RT)、呼吸(RR)、心率(HR)。 4、术前、术后12小时、术后24小时、术后36小时、术后48小时分别采血行外周血细胞计数分析(WBC、中性粒细胞)、肾功能(Cr、BUN)测定。 5、术后12小时、24小时、36小时、48小时各组家兔肾组织分别行HE染色,光学显微镜下观察形态结构变化。Western blot法检测各组肾组织TNF-α、IL-10的蛋白表达。RT-PCR(reverse translation-PCR)法检测NF-κB的基因表达。 结果 1、一般情况:sham组的体温、心率、呼吸频率在各个时间点上与control组比较,变化不大(P0.05);随造模时间的延长,sepsis组明显高于control、sham组(P0.05),并呈上升趋势,NaHS组略低于sepsis组(P0.05)。 2、血液检测指标:各组术前的血细胞计数(WBC、中性粒细胞)、Cr、Bun比较,差异无统计学意义。control组的血细胞计数(WBC、中性粒细胞)、Cr、Bun在12h、24h、36h、48h与sham组比较,差异无统计学意义(P0.05);随着造模时间的延长,sepsis组明显高于control、sham组(P0.05),并呈上升趋势,NaHS组与sepsis组比较,有下降趋势,其差异有统计学意义(P0.05)。 3、病理形态学:HE染色光镜下可见sepsis组肾组织大量炎症细胞浸润,肾小球萎缩、肾小囊扩张,肾小管管腔变大。NaHS组较sepsis组上述变化有所减轻。 4、Western Blot法检测肾组织TNF-α、IL-10的蛋白表达:Control组肾组织TNF-α的蛋白表达和sham组相比较,差异无统计学意义(P0.05);sepsis组明显高于control、sham组,随造模时间延长,呈上升趋势(P0.05);NaHS组与sepsis组比较,有下降趋势(P0.05)。 Control组肾组织IL-10的蛋白表达和sham组相比较,差异无统计学意义(P0.05);sepsis组明显高于control、sham组,随造模时间延长,呈上升趋势(P0.05);NaHS组与sepsis组比较,仍呈现上升趋势(P0.05)。 5、RT-PCR(reverse translation-PCR)法检测NF-κB的基因表达:Control组NF-κB的基因表达和sham组相比较,差异无统计学意义(P0.05);sepsis组高于control、sham组,随造模时间延长,呈现上升趋势(P0.05);NaHS组与sepsis组比较,有下降趋势(P0.05)。 结论 1、成功建立尿源性脓毒血症兔模型。 2、外源性硫化氢抑制尿源性脓毒血症模型肾组织NF-κB及TNF-α的表达,上调IL-10来减轻尿源性脓毒血症肾损伤。


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