沉默SAA表达对CNE2细胞生长增殖的影响

【摘要】：目的:沉默SAA基因在鼻咽癌CNE2细胞中的表达,研究分析SAA基因表达降低,对CNE2细胞生长增殖、BCL-2、Caspase-3及NF-КB表达的影响,初步探讨SAA基因的功能及分子机制。方法:本研究将前期已成功构建的SAA表达干扰载体p GPU6/GFP/Neo-SAA,采用脂质体法转染CNE2细胞,G418筛选,克隆挑选,建立SAA稳定低表达的p GPU6/GFP/Neo-SAACNE2细胞系,以p GPU6/GFP/Neo-CNE2细胞系、未转染的CNE2细胞系为对照组;运用流式细胞仪检测三组细胞的细胞周期改变;使用平皿克隆实验,检测细胞的生长增殖能力;以western blotting检测BCL-2、Caspase-3及NF-КB在p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2细胞系的表达水平。1、western blotting检测结果示,SAA在p GPU6/GFP/Neo-SAACNE2细胞系中表达降低;2、流式细胞仪检测结果显示,在p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2细胞系中,处于分裂期的CNE2细胞数目减少;3、平皿克隆实验结果显示,p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2细胞的生长增殖能力降低;4、western blotting检测结果示,p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2细胞系中的BCL-2表达降低,Caspase-3及NF-КB的表达增多。结论:1、成功建立SAA稳定低表达的p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2细胞系;2、SAA基因在CNE2细胞中沉默表达后,CNE2细胞表现为生长增殖速度减慢及分裂能力降低,BCL-2蛋白表达减少,Caspase-3及NF-КB蛋白表达增多。结果: