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三七多糖对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究

王耀华  
【摘要】:【目的】研究三七多糖对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探索其减轻肝脏缺血再灌注损伤作用机制。【方法】雄性SD大鼠33只,随机抽取3只制造肝左、中叶缺血再灌注模型,造模成功后将剩下的30只SD大鼠随机分为3组,对照组、模型组和三七多糖组,每组10只大鼠。三七多糖组手术操作前给予三七多糖(100mg/kg)灌胃,每天一次,连续7天,对照组和模型组则给予同等体积的生理盐水灌胃。对照组仅打开大鼠腹腔,解剖暴露肝十二指肠韧带,不再做进一步操作;模型组手术暴露第一肝门,无损伤血管夹阻断肝左、中叶入肝血流45min,随后松开血管夹再灌注4h;三七多糖组手术操作方法同模型组。灌注结束后收取标本做如下检测:测定每组大鼠血清中转氨酶(AST和ALT)变化;检测各组大鼠血清中炎性指标(TNF-α和IL-1β)变化;检测肝组织中氧化应激反应相关物丙二酮(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;光学显微镜下观察肝组织结构改变;IHC及WB测定各组大鼠肝脏组织中HO-1及TLR4的表达水平。【结果】1、模型组大鼠血清中ALT(426.86±35.89)、AST(457.34±42.78)、TNF-α(137.14±15.48)和IL-1β(185.09±17.34)与对照组ALT(28.75±4.53)、AST(32.49±3.25)、TNF-α(28.16±3.57)和IL-1β(25.47±4.13)比较显著升高(P0.01),而三七多糖组ALT(291.16±24.73)、AST(237.49±18.36)、TNF-α(81.73±7.34)、IL-1β(105.68±10.84)明显降低,与模型组比较有显著差异(P0.01)。2、模型组大鼠肝组织SOD(197.24±10.48)活性较对照组SOD(257.85±17.56)活性明显降低(P0.01),MDA(4.49±0.28)活性较对照组MDA(2.47±0.24)活性明显升高(P0.01);而三七多糖组SOD(234.40±15.37)明显升高,与模型组比较有统计学意义(P0.01),MDA(3.59±0.17)明显下降,与模型组比较有显著差异(P0.01)。3、肝组织病理学改变:对照组肝组织结构大致正常;模型组肝组织结构紊乱,肝细胞肿胀变性明显,可见不同程度的肝细胞坏死;三七多糖组肝细胞肿胀、变性、坏死程度较模型组明显减轻。4、IHC及WB检测各组大鼠肝脏组织中HO-1及TLR4的表达显示:模型组HO-1水平明显高于对照组(P0.01),三七多糖组HO-1水平显著高于模型组(P0.01);模型组TLR4水平显著高于对照组(P0.01),而三七多糖组TLR4水平显著低于模型组(P0.01)。【结论】1、三七多糖可以降低大鼠肝脏缺血再灌注损伤血清中ALT、AST的水平,减轻大鼠肝组织病理改变,对大鼠HIRI有保护作用。2、三七多糖减轻大鼠HIRI的作用可能与上调肝组织中HO-1和下调TLR4的表达,减轻炎症反应和氧化应激反应有关。


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