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miRNA-423-5p通过靶向作用S1PR1抑制大鼠缺血后肢侧枝循环形成

周丽娅  
【摘要】:研究背景:侧枝循环是机体自然形成的改善缺血组织供血的一种方式,但目前侧枝循环的形成机制尚不明确。miRNA可同时调控多种靶基因,已有多项研究表明miRNA在调控侧支循环形成中起重要作用。目的:本研究旨在通过构建大鼠后肢缺血动物模型,探讨miRNA-423-5p对侧支循环形成的影响及其发挥调控作用的靶基因。方法:本研究对象为雄性SD大鼠。将30只SD大鼠分别分为假手术组,agomir-NC组和agomir-423-5p组。结扎大鼠左侧后肢股动脉,建立大鼠后肢缺血动物模型,并在大鼠左侧后肢内收肌群多点注射空白缓冲液、agomir-NC和agomir-423-5p。观察大鼠后肢活动情况,利用激光散斑技术检测大鼠后肢血流灌注量、HE染色检测大鼠后肢内收肌侧枝血管数量、直径和面积,免疫组化检测S1PR1的表达情况。在人脐静脉内皮细胞内转染miRNA mimic 423-5p,进行免疫印迹试验(western-blot,WB)检测S1PR1的表达情况;结果:在agomir-423-5p的干预下大鼠缺血后肢肢体活动恢复不佳、血流灌注量下降、侧枝循环生成减少、S1PR1的表达下降,miRNA mimic 423-5p转染的人脐静脉内皮细胞S1PR1表达减少。结论:miRNA-423-5p可抑制大鼠缺血后肢新血管形成及血流恢复,即抑制大鼠缺血后肢侧枝循环形成,miRNA这一调控作用是通过靶向作用S1PR1起效的。


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