弓形虫侵入相关分子ROP1基因的克隆及其DNA免疫研究

【摘要】：研究目的体外扩增弓形虫4个不同分离株侵入相关分子ROP1基因；构建原核及真核表达重组质粒并表达；用DNA免疫技术将真核重组质粒pcROP1直接免疫小鼠，以了解ROP1基因的遗传稳定性；研究该基因体外表达产物的抗原性；观察其在小鼠肌肉组织中的表达、所诱导的体液和细胞免疫应答、IFN-γ基因的协同免疫作用及对弓形虫感染的保护性；探索弓形虫DNA免疫新途径，为弓形虫病的免疫预防提供理论及实验依据。研究内容包括ROP1基因重组质粒构建及其DNA免疫两部分。方法 ①弓形虫ROP1基因的体外扩增、克隆及表达从弓形虫RH、ZS1、ZS2及GT1分离株速殖子基因组DNA中扩增ROP1基因片段；构建pUC18-ROP1重组质粒，酶切及PCR鉴定。亚克隆法构建pBV220-ROP1原核表达重组质粒，经温度诱导在E.coli中表达，表达产物经SDS-PAGE及Western-blot分析；亚克隆法构建pcDNA3-ROP1真核表达重组质粒，脂质体介导法转染肝癌HEPG-2细胞株，用G418选择培养，分别收集阳性细胞克隆培养上清及细胞，SDS-PAGE及Western-blot鉴定；构建pcDNA3-IFN-γ重组质粒。②pcROP1质粒

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前20条

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2	贾荣,樊明文,边专;增强DNA疫苗免疫效果的方法(Ⅱ)[J];国外医学.口腔医学分册;2001年01期
3	刘妍;DNA免疫研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;1997年S2期
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5	贾荣;增强DNA疫苗免疫效果的方法(Ⅰ)[J];国外医学.口腔医学分册;2000年06期
6	和绍清,董承红,孙明,李琦涵;HBV和HIV的复合型DNA免疫可诱发BALB/c小鼠的细胞免疫应答[J];上海免疫学杂志;2001年01期
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11	惠静毅,李光地,孔玉英,汪垣;带有preS抗原决定簇的乙肝表面抗原的DNA免疫研究[J];科学通报;1999年02期
12	李兵,窦骏,王立新,史志英,王净,印佩钦,林陵;HCV结构区DNA疫苗诱发小鼠特异性细胞免疫反应的研究(英文)[J];免疫学杂志;2001年05期
13	瞿涤,闻玉梅,周生华,王开利,余生玲,郭盛淇,李平洋;重组质粒DNA-抗原-抗体复合物诱生乙型肝炎表面抗体的研究[J];上海医学;1997年12期
14	和绍清，李琦涵，董承红，孙明;HIV-1和HBV复合型DNA免疫的初步研究[J];云南大学学报(自然科学版);1999年03期
15	王剑虹;质粒DNA重组Opc蛋白复合物用于鼻腔DNA免疫[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2002年02期
16	熊思东,徐薇;DNA疫苗的研究进展[J];中国处方药;2003年02期
17	高阳,江丽芳,方丹云,曾祥凤;登革病毒2型E蛋白基因真核表达和DNA免疫的研究[J];中国病毒学;2003年03期
18	曹玉玺,陶三菊;用DNA免疫筛选乙型脑炎病毒保护性抗原:一项与传统病毒疫苗比较的研究[J];国外医学.病毒学分册;2000年05期
19	王剑虹,江丽君;DNA免疫诱导抗HCV核心抗原的体液与细胞免疫应答的鉴定[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2000年03期
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10	刘方;一、间接免疫荧光技术检测尖锐湿疣中的人乳头瘤病毒二、HPV6b L1 DNA疫苗的构建及免疫活性检测[D];中国协和医科大学;2004年

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10	袁文;犬瘟热病毒南京分离株核蛋白基因的克隆、表达及其免疫小鼠诱导的免疫应答[D];南京农业大学;2006年

中国重要报纸全文数据库

前1条

1	阮美勤;人类免疫系统研究进入新境界[N];光明日报;2001年

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