收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

弓形虫侵入相关分子ROP1基因的克隆及其DNA免疫研究

郭虹  
【摘要】:研究目的 体外扩增弓形虫4个不同分离株侵入相关分子ROP1基因;构建原核及真核表达重组质粒并表达;用DNA免疫技术将真核重组质粒pcROP1直接免疫小鼠,以了解ROP1基因的遗传稳定性;研究该基因体外表达产物的抗原性;观察其在小鼠肌肉组织中的表达、所诱导的体液和细胞免疫应答、IFN-γ基因的协同免疫作用及对弓形虫感染的保护性;探索弓形虫DNA免疫新途径,为弓形虫病的免疫预防提供理论及实验依据。 研究内容 包括ROP1基因重组质粒构建及其DNA免疫两部分。方法 ①弓形虫ROP1基因的体外扩增、克隆及表达 从弓形虫RH、ZS1、ZS2及GT1分离株速殖子基因组DNA中扩增ROP1基因片段;构建pUC18-ROP1重组质粒,酶切及PCR鉴定。亚克隆法构建pBV220-ROP1原核表达重组质粒,经温度诱导在E.coli中表达,表达产物经SDS-PAGE及Western-blot分析;亚克隆法构建pcDNA3-ROP1真核表达重组质粒,脂质体介导法转染肝癌HEPG-2细胞株,用G418选择培养,分别收集阳性细胞克隆培养上清及细胞,SDS-PAGE及Western-blot鉴定;构建pcDNA3-IFN-γ重组质粒。②pcROP1质粒


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈雪艳;付玉才;李璐;耿艺介;黄达娜;高世同;张仁利;;弓形虫依钙蛋白激酶Calpain-like的克隆及生物学特性[J];中国热带医学;2008年04期
2 李军建;张仁利;傅玉才;耿艺介;黄达娜;胡忠;;弓形虫RH株微线体蛋白MIC3基因的克隆与表达[J];热带医学杂志;2010年10期
3 蔡亮;杨秋林;伍和平;刘传爱;王可耕;张愉快;;弓形虫RH株膜蛋白P30的原核表达与鉴定[J];中国血吸虫病防治杂志;2006年05期
4 张晓文;惠清法;;弓形虫疫苗的研究进展[J];延安大学学报(自然科学版);2007年04期
5 高红刚;张佃波;卞传秀;刘克义;;弓形虫重组耻垢分枝杆菌M.S-P30-ROP2载体活疫苗构建及鉴定[J];中国热带医学;2007年04期
6 徐安健;谷俊朝;;刚地弓形虫基因工程疫苗[J];中国生物工程杂志;2009年11期
7 周天祥;汪学龙;张衍兴;郑胜生;王旭旭;丁言荣;;猪囊尾蚴抗原基因GP50的表达及鉴定[J];热带病与寄生虫学;2007年02期
8 肖洁;郭刚;曾明;邹全明;钟情;张卫军;;梅毒螺旋体特异抗原TP0684的克隆和表达[J];中国生物制品学杂志;2007年04期
9 云雪霞;胡静;陈清;;霍乱弧菌肠毒素B亚单位基因在大肠杆菌和双歧杆菌的表达[J];中国人兽共患病学报;2007年02期
10 殷旭仁;余传信;谢曙英;钱春艳;宋丽君;王玠;张伟;许永良;;日本血吸虫信号传导蛋白14-3-3的制备及其特性分析[J];中国血吸虫病防治杂志;2011年02期
11 罗秀金,丁贞英;23例弓形虫病的治疗及临床分析[J];中国人兽共患病杂志;1991年05期
12 程彦斌;弓形虫病实验诊断研究的进展[J];国外医学.寄生虫病分册;1996年05期
13 赵艳军,李丙午,刘群,贺耀亮;儿童弓形虫病141例临床分析[J];人民军医;1996年03期
14 吕元聪;IHA诊断弓形虫病的几个影响因素及其处理方法[J];广西预防医学;1998年01期
15 周永安;弓形虫病诊断技术的研究进展及其应用[J];中国人兽共患病杂志;2003年05期
16 徐凤全,林玲;我国弓形虫病核酸疫苗研究概况[J];中国热带医学;2005年08期
17 徐克继;各地弓形虫病血清学调查综合报道[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1988年01期
18 ;弓形虫病血清学诊断质量控制会议会议纪要[J];中国人兽共患病杂志;1992年04期
19 杨迎工,韩胜凯,高虹,刘晓星;不孕症与弓形虫感染的检测意义[J];男科学报;1995年01期
20 李丙午,赵艳军,刘群;儿童高热惊厥型弓形虫病8例[J];前卫医药杂志;1997年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 施碧红;温建新;吴伟斌;施巧琴;吴松刚;;Bacillus subtilis FS321淀粉酶基因的克隆与表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
2 李霞;余莉;罗庆礼;乔增培;沈继龙;;弓形虫次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HXGPRT)基因的克隆与原核表达[A];中华医学会热带病与寄生虫学分会机会性感染学术研讨会论文汇编[C];2007年
3 孙希萌;卢致民;向梅;刘贤勇;索勋;;吉林和河北地区人群弓形虫病血清学调查[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
4 黄达娜;吴少庭;袁仕善;张仁利;高世同;耿艺介;;弓形虫表面抗原SAG1真核表达重组质粒的构建与表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
5 王艳华;殷宏;张德林;付宝权;;弓形虫抗原表位研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
6 江涛;周艳琴;刘琴;聂浩;姚宝安;赵俊龙;;弓形虫ROP2基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
7 熊冰清;程健曦;赵永娟;周艳琴;赵俊龙;;利用rBAG1间接ELISA方法鉴别诊断慢性弓形虫病的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
8 李丽霞;李吉平;金洪涛;商立民;魏峰;刘全;;基于MALDI-TOF MS血清多肽图谱的弓形虫病快速诊断技术[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
9 殷国荣;杨亚波;孟晓丽;刘成芳;;弓形虫复合黏膜疫苗研究进展[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
10 赖庆安;刘树滔;卢菀华;陈莉;Toshihide NISHIMURA;饶平凡;;氨肽酶H的表达、纯化与表征[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郭虹;弓形虫侵入相关分子ROP1基因的克隆及其DNA免疫研究[D];中山医科大学;1999年
2 王昕;巨噬细胞集落刺激因子可溶性受体的克隆表达及其相关性研究[D];中国协和医科大学;1998年
3 邓尚龙;石斑鱼抗菌肽Hepcidin基因的克隆、表达与抗菌活性研究[D];吉林农业大学;2008年
4 李志勇;调控玉米大斑病菌生长发育和致病性的CaM基因的克隆与功能分析[D];河北农业大学;2008年
5 谢科;水稻WRKY10基因的功能研究[D];浙江大学;2005年
6 邢继红;拟南芥抗灰葡萄孢相关基因的克隆和功能分析[D];河北农业大学;2006年
7 魏继承;白桦花期抑制性消减文库的构建及花发育相关基因的克隆[D];东北林业大学;2006年
8 赵明莲;食线虫真菌侵染性胞外蛋白酶的基因克隆与表达[D];云南大学;2003年
9 李伟;圆锥小麦地方品种遗传多样性研究[D];四川农业大学;2006年
10 段冷昕;梅花鹿茸多肽的化学结构及其抗肝纤维化作用[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘占通;猪α干扰素基因克隆、原核表达及抗病毒活性研究[D];河南农业大学;2005年
2 宋凌云;鸡α干扰素基因克隆、原核表达及抗病毒活性研究[D];河南农业大学;2006年
3 祁光宇;弓形虫自然弱毒株(QHO)棒状蛋白2基因片段的克隆、表达及鉴定[D];甘肃农业大学;2007年
4 黄燕;刚地弓形虫SAG2基因的克隆、表达与ELISA方法的建立[D];上海交通大学;2007年
5 高雯;绿色木霉LTR-2β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[D];山东理工大学;2007年
6 孟文丽;江浙短尾蝮蛇纤溶酶原激活剂的原核表达、纯化及其鉴定[D];福建医科大学;2008年
7 李学仁;重组奶牛α、γ干扰素的研制及其抗病毒作用[D];南京农业大学;2005年
8 李雪峰;H3N8亚型马流感病毒内蒙古株全基因序列分析及NS1基因的原核表达[D];内蒙古农业大学;2009年
9 王改玲;鳜非特异性免疫因子的克隆及原核表达[D];西北农林科技大学;2005年
10 贾自文;猪α-干扰素的原核表达及其活性测定[D];扬州大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 白轶南;弓形虫病 危及胎儿健康[N];保健时报;2005年
2 刘越西 徐仁元 记者 金姝;世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛在吉大农学部培育成功[N];吉林日报;2011年
3 王志海 邵芹;犬弓形虫病[N];中国畜牧报;2003年
4 临城县畜牧局 李路民;猪得弓形虫病 吃了猫的亏[N];河北科技报;2002年
5 小郭;弓形虫病危害不轻[N];中国商报;2000年
6 记者 李秀萍;石河子大学转基因克隆绵羊研究取得突破[N];兵团日报(汉);2011年
7 黄勇娣;世界首例转基因克隆兔在沪诞生[N];解放日报;2007年
8 方芳;怀孕前,如何预防宠物病?[N];健康时报;2005年
9 戴培红;北京友谊医院探索治疗弓形虫病的新途径[N];中国医药报;2000年
10 邢台市兽医院 邢兰君 高社朝;猪高烧不退 没准是弓形虫病[N];河北科技报;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978