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对比剂对人肾小管上皮细胞毒性和Na~+,K~+-ATPase活性的影响

李冀  
【摘要】:研究目的:以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为模型,比较低渗和等渗对比剂的细胞毒性作用和对Na+,K+-ATPase活性的影响;研究不同渗透压、不同剂量的对比剂引起的急性肾损伤的差异;探讨对比剂肾病的发生机制。 方法:(1)正常生长的HK-2(Human kidney-2)细胞,分为对照组,低渗对比剂组,等渗对比剂组(2)分别用3种浓度(30ul/ml、60ul/ml、90ul/ml)的低渗和等渗对比剂干预细胞生长24h、48h、72h(3)用MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)法测HK-2细胞毒性变化(4)用ATP试剂盒监测Na+,K+-ATPase活性变化。 结果:1.与对照组相比,低渗、等渗对比剂干预组HK-2细胞毒性均明显增强(P0.05,P<0.05),等渗组细胞毒性较低渗组小(P0.05);2.在本实验研究时间范围内,随着对比剂浓度增加,对比剂对HK-2细胞的毒性增加,呈剂量和时间依赖性(P0.05,P0.05);3.与对照组相比,对比剂干预组Na+,K+-ATPase活性降低(P0.05,P0.05),等渗组对Na+,K+-ATPase活性的抑制较低渗组弱(P0.05);4对比剂对.HK-2细胞Na+,K+-ATPase活性的抑制呈剂量和时间依赖性,干预24h、48h、72h的差别有统计学意义(P0.05)对比剂浓度30ul/ml、60ul/ml、90ul/ml之间有统计学差异(P0.05);5. Na+,K+-ATPase活性与HK-2细胞毒性呈负相关(r=-0.794,p0.05)。 结论:对比剂对HK-2细胞有明显的毒性作用;与低渗对比剂相比,等渗对比剂对HK-2细胞损伤相对要轻;对比剂显著抑制HK-2细胞Na+,K+-ATP酶活性;对比剂用量也是CIN的影响因素之一;对比剂对HK-2细胞Na+,K+-ATP酶活性的抑制与HK-2细胞毒性有明显相关性。


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