短串联重复序列检测在产前诊断唐氏综合征中的临床价值

【摘要】：一、目的 应用实时荧光定量PCR技术建立一种短串联重复序列检测方法,评估该技术诊断唐氏综合征的效率及其对产前诊断孕妇心理状态的影响。 二、方法以D21s1411、D21s1259为检测位点,以D19s222为参照位点,用SYBR(?)GreenⅠ作为荧光染料,采用荧光定量PCR技术检测37例唐氏综合征及131例非唐氏综合征胎儿羊水标本的STR片段；分析唐氏综合征组及非唐氏综合征组的4对△Ct值。 采用Zung氏抑郁自评量表,分别在产前诊断手术前、术后第3天及获知胎儿细胞学结果前对孕妇进行心理测评。其中244例仅在术后14～28天获得细胞学结果(无快速诊断组),126例在术后第3天先获得STR-PCR诊断结果(快速诊断组),评估快速诊断技术的应用对产前诊断孕妇心理状态的影响。 三、结果 1、非唐氏组△Ct1411及△Ct1259的均数及95%置信区间均为正值,唐氏组△Ct1411及△Ct1259的均数及95%置信区间均为负值；两组间95%置信区间互不重叠。 2、非唐氏组与唐氏组位点D21s1411的△Ct值比较有统计学意义(t=12.088,P=0.000)；两组间D21s1259的△Ct值比较也有统计学意义(t=13.884,P=0.000)。 3、D21s1411诊断唐氏综合征的ROC曲线下面积为0.929,将△Ct1411=0.1327作为截止值时的灵敏度与特异度之和最大,灵敏度为91.9%,特异度为84.0%；D21s1259诊断唐氏综合征的ROC曲线下面积为0.985,将△Ct1259=-0.2016作为截止值时的灵敏度与特异度之和最大,灵敏度为100%,特异度为97.7%。 4、无快速诊断组孕妇术前、术后第3天及获知细胞学结果前三阶段的平均Zung评分分别为0.411、0.405和0.417。术后第3天与获知结果前的平均Zung评分比较有统计学差异(t=-2.217,P=0.027),抑郁症的发生率由术后第三天的7.79%上升到获知结果前的10.25%。获知结果前孕妇的抑郁情绪皇加重趋势。 5、快速诊断组手术前后三阶段的平均Zung评分分别为0.376、0.358和0.350,术后两阶段分别与术前的平均Zung评分比较均有统计学差异(t=2.117,P=0.035及t=3.088,P=0.002),抑郁症的发生率由术后第三天的7.14%降低到获知结果前的4.76%。 6、快速诊断组三阶段的Zung评分均明显低于无快速诊断组。两组间术前、术后第3天及获知细胞学结果前的统计值分别为t=4.734,P=0.000；t=6.963,P=0.000及t=10.151,P=0.000。有快速诊断组的抑郁情绪较无快速诊断组明显减轻。 四、结论 1、孕妇在等待产前诊断结果期间心理压力增大,抑郁症的发生率有上升趋势,有必要开展快速诊断技术以缓解该群体孕妇的心理压力。 2、以D21s1411和D21s1259为检测位点,应用荧光定量PCR方法检测羊水标本的STR片段,可有效判断胎儿是否为唐氏综合征,检出率达91%以上。 3、检测D21s1259位点的STR序列的诊断效果优于D21s1411。 4、D19s222适合作为快速诊断唐氏综合征的参照位点。 5、用SYBR(?)GreenⅠ试剂作为染料进行荧光定量PCR检测,操作步骤简单,成本较低,效果良好。 6、开展快速诊断技术在一定程度上可缓解产前诊断孕妇在等待胎儿染色体核型结果期间的抑郁情绪,降低孕期抑郁症的发生率。