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新生儿免疫球蛋白重链可变区基因指纹图谱分析

毛晓健  
【摘要】: 目的:构建不同胎龄(27~42周)新生儿IgH基因指纹图谱,以此为基础探讨新生儿成熟度对IgH基因谱型多样性的影响。 方法:取27~42周新生儿生后24小时内的外周血,提取RNA、进行RT-PCR反应、6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色,获得不同胎龄新生儿IgH基因指纹图谱,用Tiget凝胶图像分析仪进行曲线转化和分析,SPSS10.0统计软件包进行统计分析。 结果:①获得人类27~42周新生儿IgH基因V_H1~V_H7家族的指纹图谱。27周的新生儿各家族指纹图谱条带呈不规则分布,条带数较少,有缺失存在;28~32周以后的新生儿各家族条带形态规则,间距均匀,呈阶梯状分布。各个胎龄组的指纹图谱都没有明显的寡克隆增生情况。②在所有的新生儿中,V_H1~V_H7家族均被利用和表达,但以V_H3、V_H1和V_H7家族利用和表达程度较高。③各家族的条带数及其转化后的曲线下面积积分值,在28~32周、33~36周和37~42周新生儿之间差异无显著意义;但胎龄27周新生儿的V_H家族条带总数和曲线下面积均小于胎龄28~42周的新生儿。各组之间的分子量中位数差异不明显。 结论:首次获得胎龄27~42周人类新生儿IgH基因V_H1~V_H7家族的指纹图谱;V_H1~V_H7家族的使用和表达不平衡;28~32周可能是人类IgH基因谱型发育由不完善到趋于完善的一个转折点;28~32周到足月的新生儿IgH基因谱型发育趋于稳定。


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