新生儿免疫球蛋白重链可变区基因指纹图谱分析

【摘要】： 目的：构建不同胎龄(27～42周)新生儿IgH基因指纹图谱，以此为基础探讨新生儿成熟度对IgH基因谱型多样性的影响。 方法：取27～42周新生儿生后24小时内的外周血，提取RNA、进行RT-PCR反应、6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色，获得不同胎龄新生儿IgH基因指纹图谱，用Tiget凝胶图像分析仪进行曲线转化和分析，SPSS10．0统计软件包进行统计分析。 结果：①获得人类27～42周新生儿IgH基因V_H1～V_H7家族的指纹图谱。27周的新生儿各家族指纹图谱条带呈不规则分布，条带数较少，有缺失存在；28～32周以后的新生儿各家族条带形态规则，间距均匀，呈阶梯状分布。各个胎龄组的指纹图谱都没有明显的寡克隆增生情况。②在所有的新生儿中，V_H1～V_H7家族均被利用和表达，但以V_H3、V_H1和V_H7家族利用和表达程度较高。③各家族的条带数及其转化后的曲线下面积积分值，在28～32周、33～36周和37～42周新生儿之间差异无显著意义；但胎龄27周新生儿的V_H家族条带总数和曲线下面积均小于胎龄28～42周的新生儿。各组之间的分子量中位数差异不明显。 结论：首次获得胎龄27～42周人类新生儿IgH基因V_H1～V_H7家族的指纹图谱；V_H1～V_H7家族的使用和表达不平衡；28～32周可能是人类IgH基因谱型发育由不完善到趋于完善的一个转折点；28～32周到足月的新生儿IgH基因谱型发育趋于稳定。